Anticorpo policlonale di coniglio anti-RBX1 per WB ed ELISA - P62877

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RBX1

• RBX1 (nota anche come ROC1, RNF75) è un componente essenziale di molteplici complessi di ubiquitina ligasi E3 cullina-RING (CRL), che selezionano le proteine per l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomica, regolando la progressione del ciclo cellulare, la trasduzione del segnale e la trascrizione.
  Riferimenti correlati: PMID:10230407, PMID:10579999, PMID:11961546
• Insieme ad ARIH1, i complessi CRL mediano l'ubiquitinazione sequenziale, nella quale ARIH1 aggiunge la prima ubiquitina ai substrati.
  Riferimenti correlati: PMID:27565346
• Come parte del complesso CSA, RBX1 ubiquitina la RNA polimerasi II (POLR2A) in corrispondenza di Lys-1268, un passaggio chiave nella riparazione per escissione dei nucleotidi accoppiata alla trascrizione (TC-NER).
  Riferimenti correlati: PMID:32355176, PMID:34526721
• RBX1 è un componente essenziale del complesso Cul7-RING(FBXW8), che seleziona specifiche proteine per la degradazione.
  Riferimenti correlati: PMID:35982156
• Forma inoltre un complesso ligasi Cul9-RING che monoubiquitina p53/TP53.
  Riferimenti correlati: PMID:38605244
• RBX1 recluta l'enzima E2 CDC34 nel complesso CRL e può stimolarne l'autoubiquitinazione; inoltre promuove la neddilazione delle culline tramite UBE2M.
• È coinvolta nell'ubiquitinazione di KEAP1, ENC1 e KLHL41 e, insieme ad ATF2 e CUL3, promuove la degradazione di KAT5, modulando l'attivazione di ATM.
• La proteina è localizzata sia nel citoplasma sia nel nucleo, è ampiamente espressa e contiene un dominio a dita di zinco essenziale per la sua attività di ligasi E3; è soggetta ad acetilazione e fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1-100 di RBX1 umano (NP_055063.1). Per il WB, si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali provenienti da linee cellulari umane, di topo o di ratto; il peso molecolare previsto è di circa 12 kDa. Utilizzare condizioni appropriate di bloccaggio e rilevazione.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare RBX1 nel siero o in saggi con proteine purificate; validare il test con controlli positivi e negativi appropriati.
• Considerato il ruolo centrale di RBX1 nell'ubiquitinazione, si consiglia di utilizzare inibitori del proteasoma (ad es. MG132) per stabilizzare i substrati ubiquitinati nel proprio sistema sperimentale.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ciascuna applicazione e tipologia di campione; per la reattività crociata con topo e ratto, verificare l'omologia di sequenza specie-specifica nella regione dell'immunogeno.

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