Anticorpo monoclonale di coniglio RCHY1 per WB e ELISA - Q96PM5

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RCHY1

• RCHY1 è una ligasi E3 ubiquitina-proteica che ubiquitina molteplici bersagli, tra cui p53/TP53, TP73, HDAC1 e CDKN1B (PubMed:16914734, PubMed:17721809, PubMed:18006823). Riferimenti correlati: PMID:16914734 PMID:17721809 PMID:18006823
• Media l'ubiquitinazione e la degradazione di p53/TP53, con una preferenza per p53 tetramerico, influenzando l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi (PubMed:19043414, PubMed:19483087). Riferimenti correlati: PMID:19043414 PMID:19483087
• Mono-ubiquitina la DNA polimerasi da translesione POLH, regolando la tolleranza al danno al DNA (PubMed:21791603). Riferimenti correlati: PMID:21791603
• Partecipa al controllo di qualità associato al ribosoma ubiquitinando le catene nascenti bloccate, facilitandone la degradazione (PubMed:33909987). Riferimenti correlati: PMID:33909987
• Un isoforma derivante da splicing alternativo è priva di attività ligasica E3 ubiquitina-proteica.
• Localizzata nel nucleo (incluse le speckle nucleari) e nel citoplasma.
• Modificata post-traduzionalmente per fosforilazione.
• Contiene domini dita di zinco C3HC4-type RING e CHY, che legano lo zinco e sono essenziali per la funzione catalitica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 160-261 dell'RCHY1 umano, una regione che può fornire epitopi accessibili in condizioni denaturanti (WB) e native (ELISA).
• Per l'analisi WB, caricare lisati cellulari totali da linee cellulari umane e attendersi una banda vicina a 30 kDa; validare con un controllo positivo noto e un appropriato controllo negativo (ad es., cellule knockout per RCHY1).
• Per l'ELISA, utilizzare come standard la proteina RCHY1 ricombinante e confermare la specificità mediante competizione o testando l'anticorpo su campioni privi del bersaglio.
• Poiché RCHY1 è una fosfoproteina, considerare esperimenti di trattamento con fosfatasi se si osservano variazioni nella mobilità delle bande.
• Titolare sempre l'anticorpo partendo da una concentrazione iniziale raccomandata per determinare la diluizione di lavoro ottimale per ogni saggio.

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