RHOU Coniglio pAb - Q7L0Q8

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RHOU

• RHOU, noto anche come GTPasi simile a CDC42 1, WRCH-1 o ARHU, è un membro della famiglia Rho delle piccole GTPasi che condividono somiglianze con CDC42.
• Si lega e attiva la chinasi proteica serina/treonina PAK1, collegandola a vie di segnalazione a valle coinvolte nella dinamica del citoscheletro. Riferimenti correlati: PMID:11459829
• RHOU svolge un ruolo nella regolazione della morfologia cellulare, dell'organizzazione del citoscheletro e dell'assemblaggio delle adesioni focali durante la migrazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11459829 PMID:17620058 PMID:18086875
• La proteina stimola le cellule quiescenti a rientrare nel ciclo cellulare, suggerendo un ruolo nel controllo della proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11459829
• RHOU non presenta attività GTPasi rilevabile; invece, la sua elevata attività intrinseca di scambio di nucleotidi guaninici indica che è costitutivamente legata al GTP, consentendo l'attivazione continua degli effettori. Riferimenti correlati: PMID:16472646
• La proteina si localizza alla membrana cellulare, alla membrana dell'apparato di Golgi, alle adesioni focali e ai podosomi, posizionandola in siti chiave per l'adesione e la migrazione cellulare.
• RHOU è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, con livelli elevati osservati nello stomaco, nell'intestino tenue, nel cervello, nel muscolo scheletrico e nella placenta.
• Le parole chiave di UniProt evidenziano il suo coinvolgimento nello splicing alternativo, nella formazione di legami isopeptidici, nelle modifiche delle lipoproteine e nella coniugazione dell'ubiquitina, indicando una complessa regolazione post-traduzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 40-100 del RHOU umano; verificare la specificità dell'anticorpo testandolo nel sistema di campione pertinente, preferibilmente con un saggio di competizione peptidica o con lisati di proteine sovraespressate/marcate.
• Per il western blotting, considerare di iniziare con un intervallo di diluizione di 1:500–1:2000, ottimizzando in base al rapporto segnale/rumore nel proprio setup sperimentale. Utilizzare tamponi di blocco appropriati (es. 5% latte scremato o BSA) per ridurre il rumore di fondo.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo contro il peptide immunizzante o la proteina ricombinante per determinare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevamento.
• Dato che l'anticorpo presenta reattività crociata con il mouse, convalidare la sua reattività e specificità nei lisati cellulari o tissutali del mouse se sono pianificati esperimenti cross-species.
• A causa della mancanza di attività GTPasi rilevabile nel RHOU, gli esperimenti che valutano l'attività GTPasi potrebbero non essere applicabili; concentrarsi sugli studi di espressione o localizzazione.

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