Anticorpo Policlonale RING1A (Coniglio) per WB, IHC-P, ELISA - Q06587

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RING1A

• RING1A, noto anche come RNF1 o proteina del complesso Polycomb RING1, è un'E3 ubiquitina-protein ligasi che svolge un ruolo centrale nella modificazione degli istoni e nella regolazione epigenetica genica.
• Costituisce una delle E3 ligasi che mediano la monoubiquitinazione dell'istone H2A in posizione Lis-119, una modificazione che funge da marcatore specifico per la repressione trascrizionale ed è essenziale per l'inattivazione del cromosoma X nei mammiferi femmina.
• RING1A è un componente centrale del complesso repressivo Polycomb 1 (PRC1), che mantiene lo stato silenziato dei regolatori chiave dello sviluppo come i geni Hox attraverso il rimodellamento della cromatina e cambiamenti ereditari nell'espressione genica.
• Rispetto al suo paralogo RNF2/RING2, RING1A mostra un'attività intrinseca di E3 ligasi più debole e si ritiene che funzioni principalmente come modulatore o fattore accessorio per l'ubiquitinazione dell'istone mediata da RNF2/RING2.
• Esistono diverse isoforme dovute allo splicing alternativo; la proteina contiene un dominio a dito di zinco di tipo RING essenziale per la sua funzione di ubiquitina ligasi, insieme a motivi per il legame dei metalli e la regolazione della cromatina.
• RING1A si localizza nel nucleo ed è arricchito nelle speckle nucleari, coerente con il suo ruolo nella regolazione della trascrizione e nell'organizzazione della cromatina.
• È soggetto a fosforilazione ed è stato identificato in studi di proteomica, indicando un controllo post-traduzionale dinamico della sua attività all'interno del nucleo.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 207-406, una regione che copre parte del dominio C-terminale; pertanto l'anticorpo può riconoscere RING1A full-length e potenzialmente alcune varianti di splicing, ma si raccomanda la validazione su campioni appropriati.
• Per Western blot (WB) è prevista una banda a circa 42 kDa; considerare l'utilizzo di estratti nucleari o lisati cellulari totali da linee cellulari di uomo, topo o ratto come controlli positivi e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario.
• Per l'immunistochimica (IHC-P), validare l'anticorpo su sezioni di tessuto inclusi in paraffina noti per esprimere RING1A, applicando metodi appropriati di recupero dell'antigene e testando un intervallo di diluizioni per ottenere una colorazione nucleare specifica.
• In ELISA, la natura policlonale permette un utilizzo flessibile come reagente di cattura o di rilevazione; tuttavia, l'abbinamento con un anticorpo monoclonale può migliorare la specificità nei formati sandwich: la variabilità tra lotti deve essere valutata durante lo sviluppo del test.

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