Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ROCK2 per WB, IHC-P, ELISA - O75116

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ROCK2

• ROCK2 (protein chinasi 2 associata a Rho, nota anche come ROCK-II o p164 ROCK-2) è una protein-chinasi serina/treonina codificata dal gene ROCK2.
• È un regolatore chiave del citoscheletro di actina e della polarità cellulare, coinvolto nella contrazione della muscolatura liscia, nella formazione delle fibre da stress e delle adesioni focali, nella retrazione dei neuriti, nell'adesione cellulare e nella motilità.
• ROCK2 fosforila diversi substrati, tra cui ADD1, BRCA2, CNN1, EZR, DPYSL2, EP300, MSN, MYL9/MLC2, NPM1, RDX, PPP1R12A, VIM, SORL1 e IRF4, mediando diversi processi cellulari.
• La proteina agisce come regolatore negativo dell'attivazione delle cellule endoteliali angiogeniche indotta da VEGF e regola positivamente MAPK1/3 e p90RSK durante la differenziazione miogenica.
• Svolge un ruolo nella duplicazione dei centrosomi, nell'inibizione della differenziazione terminale dei cheratinociti e può regolare la chiusura delle palpebre e della parete ventrale del corpo attraverso l'organizzazione actomiosinica.
• Nell'ippocampo, ROCK2 è essenziale per la regolazione delle proprietà delle spine dendritiche e sinaptiche e contribuisce inoltre al ritmo circadiano della sensibilità al Ca²⁺ dei miofilamenti aortici e della contrattilità vascolare.
• A livello subcellulare, ROCK2 è localizzata nel citoplasma, nella membrana cellulare, nel nucleo, nel citoscheletro, nel centro organizzatore dei microtubuli e nel centrosoma.
• La proteina contiene domini coiled-coil e zinc-finger e ha un peso molecolare di circa 160,9 kDa; è espressa nel cervello ed è classificata come fosfoproteina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (ad es. 6-8%) per separare efficacemente la proteina ROCK2 di grandi dimensioni (~161 kDa) e di garantire un tempo di trasferimento adeguato su membrane per proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunoistochimica (paraffina), le condizioni di recupero antigenico possono richiedere un'ottimizzazione empirica; testare metodi basati su acido citrico o EDTA in base al tipo di tessuto.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo in lisati di controllo positivo ottenuti da linee cellulari umane, murine o di ratto note per esprimere ROCK2 (ad es. HeLa, NIH/3T3 o tessuti cerebrali) prima dell'uso sperimentale.
• I protocolli ELISA possono trarre vantaggio da esperimenti di blocco con peptide per confermare la specificità; titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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