Anticorpo policlonale coniglio SARS-CoV-2 NSP10 per WB, IP, ELISA - P0DTD1

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della NSP10

• La NSP10 è una proteina non strutturale codificata dal gene della replicasi SARS-CoV-2 (rep) come parte della poliproteina ORF1ab (Poliproteina replicasi 1ab, P0DTD1). Viene rilasciata tramite clivaggio proteolitico della poliproteina.
• La NSP10 svolge un ruolo fondamentale nella trascrizione virale stimolando sia l'attività esoribonucleasica 3'-5' della nsp14 (correzione di bozze) sia l'attività 2'-O-metiltransferasi della nsp16, garantendo così una corretta metilazione del cappuccio dell'mRNA virale.
  Riferimenti correlati: PMID:35944563
• La NSP10 si localizza prevalentemente nel citoplasma dell'ospite e nella regione perinucleare, dove interagisce con altre proteine non strutturali per formare il complesso replicazione-trascrizione (RTC).
• Come cofattore critico, la NSP10 è essenziale per la capping dell'RNA virale, che aiuta il virus a evadere i sensori immunitari innati dell'ospite come IFIT1 e IFIT3.
• La proteina è altamente conservata tra i coronavirus, rendendola un potenziale bersaglio per terapie antivirali e un antigene rilevante per lo sviluppo di anticorpi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 1–139 della NSP10 SARS-CoV-2 (YP_009725306.1). Questo costrutto a lunghezza completa dovrebbe generare anticorpi che riconoscono molteplici epitopi, offrendo una rilevazione robusta nei saggi.
• Gli anticorpi policlonali possono presentare una leggera variabilità da lotto a lotto; si consiglia di titolare e validare l'anticorpo nel sistema sperimentale specifico (es. lisati di cellule infette per WB, IP o ELISA).
• Per il Western blot, considerare l'utilizzo di controlli positivi appropriati come lisati di cellule infette da SARS-CoV-2 o NSP10 sovraespressa. Si noti che la NSP10 migra a ~14 kDa, mentre i 794 kDa riportati riflettono la poliproteina replicasi a lunghezza completa.
• Nell'immunoprecipitazione, l'anticorpo può co-immunoprecipitare partner di interazione come nsp14 e nsp16; validare attentamente le condizioni di co-IP.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo della proteina ricombinante NSP10 come standard per valutare la sensibilità e la specificità dell'anticorpo prima di testare con campioni clinici.

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