Anticorpo policlonale di coniglio anti SARS-CoV-2 NSP6 per WB ed ELISA - P0DTD1

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SARS-CoV-2 NSP6

• NSP6 è un prodotto di clivaggio della poliproteina replicasica 1ab (ORF1ab) codificata da SARS-CoV-2, rilasciata dalla proteasi principale virale.
• Svolge un ruolo critico nella formazione e nel mantenimento delle vescicole a doppia membrana (DMV), che sono organelli di replicazione virale. NSP6 "cerniera" le membrane del reticolo endoplasmatico e si connette alle goccioline lipidiche, facilitando la biogenesi delle DMV. Riferimenti correlati: PMID:35551511
• Interagisce con TBK1 dell'ospite senza influenzarne la fosforilazione, portando a una diminuita fosforilazione di IRF3 e all'inibizione della produzione di interferone di tipo I, contribuendo così all'evasione dell'immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:32979938
• Localizzazione subcellulare: membrana del reticolo endoplasmatico dell'ospite, DMV e regione perinucleare, coerente con il suo ruolo nel rimodellamento delle membrane.
• Previsto contenere multipli domini transmembrana, permettendo l'associazione alla membrana del RE e le funzioni di "cernieramento" delle membrane.
• Coinvolta nell'immunoevasione virale e nella soppressione delle risposte immunitarie innate dell'ospite; identificata come un fattore chiave nella replicazione e patogenicità di SARS-CoV-2.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 236-290 di NSP6 (YP_009725302.1), una regione conservata tra gli isolati di SARS-CoV-2. Considerare l'uso di lisati di cellule infette o cellule trasfettate che esprimono NSP6 per la validazione.
• Per il Western blot, notare che l'anticorpo può rilevare sia la poliproteina replicasica a lunghezza intera (~794 kDa) che il prodotto NSP6 clivato. Validare le dimensioni delle bande osservate nel proprio sistema sperimentale e includere controlli appropriati per confermare la specificità.
• Per l'ELISA, proteina ricombinante purificata NSP6 o lisati virali possono essere utilizzati come antigeni di rivestimento. Ottimizzare le concentrazioni di anticorpo e antigene per il miglior rapporto segnale/rumore.
• Titolare sempre l'anticorpo per ciascuna applicazione e includere controlli positivi e negativi per garantire risultati affidabili.

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