SARS-CoV-2 ORF3A Anticorpo Policlonale di Coniglio - P0DTC3

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina ORF3A di SARS-CoV-2

• La proteina ORF3a è una proteina accessoria di SARS-CoV-2, nota anche come Proteina 3a, Proteina U274 o Proteina X1.
• Svolge un ruolo chiave nell'egress virale facilitando il traffico lisosomiale dei virioni (PubMed:33157038, PubMed:33422265). Riferimenti correlati: PMID:33157038 PMID:33422265
• ORF3a forma canali ionici omotetramerici (viroporine) nelle membrane endosomiali e lisosomiali, potenzialmente inducendo la deacidificazione lisosomiale per promuovere il rilascio sicuro del virus (PubMed:33157038, PubMed:33422265, PubMed:34158638). Riferimenti correlati: PMID:33157038 PMID:33422265 PMID:34158638
• La proteina interrompe l'autofagia dell'ospite legandosi a VPS39 sugli endosomi tardivi, bloccando la fusione autofagosoma-lisosoma e la formazione di autolisosomi (PubMed:33422265). Riferimenti correlati: PMID:33422265
• ORF3a induce la reticulofagia dipendente da RETREG1/FAM134B interagendo con HMGB1, potenziando l'associazione HMGB1-BECN1 e causando stress del reticolo endoplasmatico e risposte pro-infiammatorie (PubMed:35239449). Riferimenti correlati: PMID:35239449
• A livello subcellulare, ORF3a si localizza nel virione, nella membrana cellulare dell'ospite, nella membrana del reticolo endoplasmatico, in forme secrete, nel citoplasma, negli endosomi e nei lisosomi.
• Parole chiave biologiche includono glicoproteina, interazione ospite-virus, canale ionico, trasporto ionico, attivazione dell'autofagia dell'ospite e attività viroporina.
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di ~31.1 kDa (UniProt), coerente con i 31 kDa attesi osservati per questo anticorpo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 100-200 della proteina ORF3a; gli epitopi di legame dell'anticorpo potrebbero essere concentrati in questa regione, aspetto da considerare nella progettazione degli esperimenti o nell'interpretazione dei risultati.
• Per il Western blot, la banda attesa per ORF3a è intorno a 31 kDa; convalidare la specificità utilizzando lisati di cellule infettate da SARS-CoV-2 o sistemi che sovraesprimono ORF3a.
• Nelle applicazioni ELISA, confermare le condizioni ottimali di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo utilizzando proteina ORF3a ricombinante o controlli positivi definiti.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza tra lotto e lotto può variare; si consiglia di qualificare ogni nuovo lotto nell'applicazione prevista prima dell'uso su larga scala.
• L'anticorpo viene spedito su ghiaccio umido; al ricevimento, aliquottare e conservare a -20°C (o come raccomandato dal produttore) per mantenerne la stabilità.

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