Anticorpo policlonale coniglio SH2B1 per IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NRF2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SH2B1

• La proteina adattatrice SH2B 1 (SH2B1, nota anche come PSM) è una proteina adattatrice intracellulare che priva di attività enzimatica intrinseca ma contiene domini SH2 e PH, consentendo il reclutamento verso recettori e adattatori contenenti fosfotirosina.
• Funziona come mediatore di segnalazione critico per molteplici recettori tirosin chinasi (RTK) e recettori di citochine associati alla chinasi Janus (JAK), inclusi insulina, fattore di crescita insulino-simile 1 (IGF1), fattore di crescita nervoso (NGF), fattore neurotrofico derivato dal cervello (BDNF), fattore neurotrofico derivato dalla linea delle cellule gliali (GDNF), fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGF) e fattori di crescita dei fibroblasti (FGF).
• Nella segnalazione dell'ormone della crescita (GH) e della leptina, SH2B1 si lega alla JAK2 autofosforilata e potenzia l'attività chinasica della JAK2, promuovendo le vie a valle come PI3K-Akt tramite la fosforilazione di IRS1/2.
• Gli isoforme di SH2B1, generati per splicing alternativo, possono modulare differenzialmente la segnalazione; ad esempio, possono esibire ruoli distinti nella mitogenesi indotta da IGF1 e PDGF.
• A livello subcellulare, SH2B1 si localizza nel citoplasma, nella membrana cellulare e nel nucleo, coerente con il suo ruolo dinamico nella trasduzione del segnale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione sui residui tirosina e serina/treonina (es. da parte di JAK2), che creano siti di attracco per altre proteine di segnalazione, e la metilazione.
• SH2B1 è ampiamente espresso nei tessuti, con i livelli più alti rilevati nel muscolo scheletrico e nell'ovaio, riflettendo le sue ampie funzioni regolatorie.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per IHC-P, considerare l'ottimizzazione del recupero dell'antigene e della diluizione dell'anticorpo primario utilizzando tessuti di controllo positivo come muscolo scheletrico o ovaio, dove SH2B1 è altamente espresso.
• Per IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere determinate empiricamente; l'anticorpo può rilevare pool di membrana, citoplasmatici e/o nucleari a seconda del tipo di cellula e della stimolazione.
• Data la natura policlonale di questo anticorpo, è consigliabile eseguire un esperimento di titazion e convalidare la specificità utilizzando controlli di knockdown o knockout per tenere conto della potenziale variabilità tra lotti.
• ELISA può essere utilizzato per rilevare SH2B1 endogeno; tuttavia, gli standard appropriati e i protocolli di preparazione del campione dovrebbero essere ottimizzati per il formato specifico dell'analisi.
• Si prevede che questo anticorpo cross-reagisca con SH2B1 di topo e ratto in base all'omologia di sequenza, ma si raccomanda la convalida sperimentale in queste specie.

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