Anticorpo Monoclonale Rabbit Smac/Diablo per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NR28

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Smac/Diablo

• Il gene DIABLO (SMAC) codifica per una proteina mitocondriale che promuove l'apoptosi attivando le caspasi nella via del citocromo c/Apaf-1/caspasi-9. Si oppone alle proteine inibitrici dell'apoptosi (IAP), tra cui BIRC6/BRUCE, caspasi-9 e XIAP/BIRC4. Riferimenti correlati: PMID:15200957 PMID:36758104 PMID:36758105
• Smac/Diablo attenua la stabilità e l'attività inibitoria dell'apoptosi di XIAP/BIRC4 promuovendone l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomica, e interrompe l'interazione XIAP/caspasi-9 per facilitare l'attivazione della caspasi-3.
• Lo splicing alternativo produce più isoforme; l'isoforma 3 è espressa in modo ubiquitario e potrebbe essere difettosa nella down-regolazione di XIAP.
• Subcellularmente, Smac/Diablo si localizza nel mitocondrio e viene rilasciato nel citosol in seguito a stimoli apoptotici.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario con i livelli più alti nel testicolo; è presente a livelli elevati anche in cuore, fegato, rene, milza, prostata e ovaio; a livelli bassi in cervello, polmone, timo e leucociti del sangue periferico.
• Parole chiave: struttura 3D, splicing alternativo, apoptosi, citoplasma, sordità, sequenziamento proteico diretto, variante patologica, mitocondrio, sordità non sindromica, coniugazione Ubl.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno ricombinante (aa 56-239) corrisponde alla regione matura processata che ci si aspetta dopo il taglio mitocondriale; l'anticorpo può rilevare sia la forma full-length (27 kDa) sia le forme processate (21/22 kDa).
• Per il Western blot, si consiglia di caricare lisati di controllo positivo appropriati da tessuti di uomo, topo o ratto e ottimizzare le condizioni riducenti per risolvere le diverse isoforme.
• In IHC-P e IF/ICC, il recupero dell'antigene (ad es. tampone citrato pH 6.0) e la permeabilizzazione devono essere ottimizzati; i pattern di colorazione citoplasmatica/mitocondriale possono richiedere una validazione accurata.
• Le applicazioni ELISA richiedono la titolazione individuale dei reagenti di cattura e rilevamento; l'anticorpo può essere valutato come parte di una coppia corrispondente dopo test funzionali.

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