Anticorpo Monoclonale Coniglio Smad5 per WB, IP, ELISA - Q99717

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Smad5

• SMAD5 (Mothers against decapentaplegic omologo 5), noto anche come JV5-1 o MADH5, è un membro della famiglia di fattori di trascrizione SMAD che trasduce segnali dai ligandi della superfamiglia TGF‑β.
• Seguendo la stimolazione con proteine morfogenetiche ossee (BMP), SMAD5 viene fosforilato dai recettori BMP di tipo I, spingendo la sua associazione con SMAD4. Il complesso risultante transloca nel nucleo e si lega agli Elementi di Legame Smad (SBEs) per regolare l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:9442019 PMID:33510867
• SMAD5 è essenziale per lo sviluppo embrionale, la differenziazione cellulare, l'angiogenesi e l'omeostasi tissutale. Riferimenti correlati: PMID:12064918 PMID:16516194
• Nello stato non‑fosforilato, SMAD5 esercita un ruolo citoplasmatico nel metabolismo energetico migliorando la respirazione mitocondriale e la glicolisi attraverso un'interazione con l'esochinasi 1 (HK1). Riferimenti correlati: PMID:28675158
• Studi sulla localizzazione subcellulare rivelano SMAD5 nel citoplasma, nel nucleo e nel mitocondrio, riflettendo le sue diverse funzioni di segnalazione e metabolismo.
• SMAD5 è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani.
• Le modificazioni post‑traduzionali includono la fosforilazione e l'acetilazione; contiene anche un dominio di legame allo zinco caratteristico delle proteine SMAD.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 200–300 di SMAD5 umano. L'anticorpo monoclonale di coniglio risultante è previsto per riconoscere la proteina SMAD5 totale; potrebbe non distinguere tra le forme fosforilate e non fosforilate a meno che l'epitopo fosforilato non rientri in questa regione.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 52 kDa. Considerare il trattamento delle cellule con ligandi BMP (es. BMP2/BMP4) per visualizzare i cambiamenti di SMAD5 fosforilato o per verificare l'attivazione della via.
• Questo anticorpo è adatto per l'immunoprecipitazione di SMAD5 endogeno da lisati umani e murini; raccomandiamo di ottimizzare le condizioni di lisi e lavaggio per gli studi di co‑immunoprecipitazione.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione di SMAD5 in formati ELISA a base di peptidi o a sandwich. Validare con proteina SMAD5 ricombinante o lisati cellulari.
• Come per qualsiasi anticorpo, validare la specificità nel vostro sistema sperimentale utilizzando appropriati controlli positivi (es. HeLa trattate con BMP, HEK293) e negativi (es. knockdown mediato da siRNA).

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