Anticorpo policlonale coniglio SMPD4 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9NXE4

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SMPD4

• SMPD4 (Sfingomielina fosfodiesterasi 4), nota anche come nSMase-3, SKNY, NET13, è codificata dal gene SMPD4 e produce isoforme tramite splicing alternativo.
• Catalizza l'idrolisi della sfingomielina in ceramide e fosforilcolina, regolando l'omeostasi degli sfingolipidi di membrana (PubMed:16517606, PubMed:25180167). Riferimenti correlati: PMID:16517606, PMID:25180167
• Gioca un ruolo nell'organizzazione e nella funzione del reticolo endoplasmatico, influenzando l'integrità della membrana (PubMed:31495489). Riferimenti correlati: PMID:31495489
• Può sensibilizzare le cellule all'apoptosi indotta da danni al DNA (PubMed:18505924). Riferimenti correlati: PMID:18505924
• Nel muscolo scheletrico, media la produzione di ossidanti stimolata dal TNF (Per analogia).
• Si localizza alla membrana del reticolo endoplasmatico, alla membrana dell'apparato di Golgi, all'involucro nucleare, alla membrana cellulare e al sarcolemma.
• Ampiamente espresso, con i livelli più alti nel cuore e nel muscolo scheletrico; rilevato nel muscolo scheletrico a livello proteico.
• Associato a disabilità intellettiva (variante della malattia).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli aminoacidi 600-800 del SMPD4 umano (NP_060421.2). Per l'ottimizzazione del saggio, considerare di eseguire la mappatura dell'epitopo o di utilizzare questa regione per i controlli di specificità.
• SMPD4 è una proteina transmembrana multipasso con un peso molecolare previsto di ~98 kDa. Assicurarsi di utilizzare protocolli di estrazione appropriati per le proteine di membrana e includere controlli positivi (es. lisati di cuore o muscolo scheletrico).
• Per il Western blot, considerare l'uso di un agente riducente e il riscaldamento per garantire la completa denaturazione dei domini transmembrana.
• L'anticorpo è validato per WB, IF/ICC ed ELISA con campioni umani e di topo. Eseguire la validazione della reattività crociata nel modello sperimentale specifico.
• Per IF/ICC, potrebbe essere richiesta la permeabilizzazione per rilevare la localizzazione al RE/Golgi/involucro nucleare; dovrebbero essere testati metodi di fissazione adeguati.

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