Anticorpo monoclonale di coniglio SNX4 per WB, IP, ELISA - O95219

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SNX4

• SNX4, o nexina di sorting-4, è un membro della famiglia delle proteine nexine di sorting, caratterizzate dalla presenza di un dominio phox-omologia (PX) che facilita il legame con i fosfoinositidi e l'associazione con le membrane.
• SNX4 svolge un ruolo centrale nella regolazione dell'endocitosi e di molteplici fasi del traffico intracellulare (PubMed:12668730, PubMed:17994011, PubMed:32513819). Riferimenti correlati: PMID:12668730 PMID:17994011 PMID:32513819
• È specificamente coinvolto nel riciclo del recettore della transferrina endocitato, prevenendone la degradazione lisosomiale e mantenendo così l'omeostasi del ferro (PubMed:17994011). Riferimenti correlati: PMID:17994011
• SNX4 contribuisce alla biogenesi dell'autofagosoma mediando il traffico e il riciclo della scramblasi fosfolipidica ATG9A, una proteina chiave necessaria per l'autofagia (PubMed:32513819, PubMed:33468622). Riferimenti correlati: PMID:32513819 PMID:33468622
• A livello subcellulare, SNX4 si localizza prevalentemente sulla faccia citoplasmatica delle membrane degli endosomi precoci, dove partecipa alla selezione del carico e alla formazione delle vescicole.
• Le modificazioni post-traduzionali di SNX4 includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività, la localizzazione o le interazioni proteiche.
• Il gene SNX4 subisce uno splicing alternativo, dando origine a varianti trascrizionali multiple che possono codificare isoforme proteiche distinte con potenziali funzioni diverse.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde a un frammento ricombinante che copre gli amminoacidi 321–400 di SNX4 umano, vicino alla regione C-terminale, il che può consentire il riconoscimento delle conformazioni proteiche native e denaturate.
• Per il Western blot, preparare lisati cellulari totali utilizzando il tampone RIPA standard o il tampone per campioni SDS; ci si aspetta una banda proteica vicino a 52 kDa in condizioni riducenti. Si consiglia di includere un controllo positivo come estratti di cellule HeLa o HEK293T, che esprimono SNX4 endogeno.
• Nei saggi di immunoprecipitazione, ottimizzare il rapporto anticorpo/lisato e utilizzare un sistema di perle compatibile (ad es. agarosio proteina A/G) per gli anticorpi IgG di coniglio. Validare il recupero mediante Western blot con un diverso anticorpo anti-SNX4.
• Per le applicazioni ELISA, testare un intervallo di concentrazioni dell'antigene di rivestimento e diluizioni dell'anticorpo utilizzando proteina o peptide SNX4 ricombinante. Assicurarsi che l'epitopo sia accessibile nel formato di rivestimento.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con SNX4 murino; eseguire una validazione iniziale sia in sistemi modello umani che murini per confermare le prestazioni specifiche per specie.
• Poiché SNX4 funziona in percorsi dinamici di traffico di membrana, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per l'immunofluorescenza potrebbero richiedere ottimizzazione, sebbene questa applicazione non sia specificata per questo prodotto.

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