Anticorpo policlonale coniglio STX1A per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16623

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Sintassina-1A

• STX1A codifica per la sintassina-1A, una proteina di membrana specifica per i neuroni nota anche come HPC-1, che appartiene alla famiglia delle sintassine di proteine SNARE ed è essenziale per l'esocitosi e l'endocitosi calcio-dipendenti di ormoni e neurotrasmettitori. Riferimenti bibliografici: PMID:26635000
• La sintassina-1A forma il complesso SNARE centrale insieme a SNAP25 sulla membrana plasmatica e VAMP2 sulle vescicole sinaptiche; questo complesso guida la fusione delle vescicole sinaptiche con la membrana presinaptica, consentendo il rilascio rapido di neurotrasmettitori.
• Al di fuori del sistema nervoso centrale, STX1A partecipa all'esocitosi regolata in altri tessuti, come la secrezione di insulina dalle cellule beta pancreatiche, il rilascio di GLP-1 e l'esocitosi acrosomiale nello sperma. Riferimenti bibliografici: PMID:23091057
• La proteina si localizza principalmente sulla faccia citoplasmatica della membrana plasmatica ed è arricchita nelle sinapsi e nei sinaptosomi; si trova anche sulle vescicole di secrezione e può essere secreta in forma solubile.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e ubiquitinazione (formazione di legame isopeptidico), che modulano l'assemblaggio e la stabilità del complesso SNARE; la proteina contiene inoltre un dominio a coil coil fondamentale per la sua funzione.
• STX1A è espressa in alte quantità nel midollo spinale embrionale, nei gangli, nel cervelletto adulto e nella corteccia cerebrale, con espressione aggiuntiva in cuore, fegato, tessuto adiposo, muscolo scheletrico e rene.
• L'arrangiamento alternativo degli esoni genera più isoforme, e varianti rare sono state implicate nella sindrome di Williams-Beuren, evidenziando la rilevanza clinica della proteina nelle malattie neurologiche.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1–100 di STX1A umana, che include la regione N-terminale; questa regione è relativamente conservata tra uomo, topo e ratto, in linea con la reattività crociata riportata.
• Per Western blot, in condizioni riducenti ci si aspetta una banda intorno a 33 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di cervello o di cellule neuronali come controlli positivi.
• In IHC-P e IF/ICC, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene, e la fissazione con formaldeide deve essere ottimizzata; ci si aspetta una forte colorazione sinaptica nei tessuti neurali.
• L'anticorpo potrebbe essere adatto per ELISA; tuttavia, i fattori di diluizione specifici devono essere determinati empiricamente per ogni applicazione e tipo di campione.
• Interpretando i risultati, tenete conto che STX1A esiste in più compartimenti (membrana plasmatica, vescicole, secreta), quindi studi di frazionamento o di co-localizzazione possono arricchire pool specifici della proteina.

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