Anticorpo Policlonale di Coniglio contro la Simmetrica DiMetil-Istone H3-R2 (Q16695/P68431) per WB, IHC, IF, ELISA, ChIP-seq

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

L'istone H3 è una delle proteine istoniche core che, insieme a H2A, H2B e H4, forma la particella centrale del nucleosoma. I nucleosomi avvolgono e compattano il DNA nella cromatina, svolgendo un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Sia l'istone H3.1 (codificato da geni multipli inclusi H3C1, H3C2, ecc.) che H3.1t (codificato da H3-4) sono espressi nelle cellule umane, con H3.1t prevalentemente presente nelle cellule testicolari. Riferimenti correlati: UniProt Q16695

Gli istoni subiscono una vasta gamma di modificazioni post-traduzionali (PTM), tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione e altre, collettivamente note come "codice istonico". Queste modificazioni regolano la struttura della cromatina e l'espressione genica. Tra queste, la dimetilazione simmetrica dei residui di arginina è catalizzata dalle proteine arginina metiltransferasi come PRMT5. Ad esempio, è stata riportata la dimetilazione simmetrica all'arginina 9 dell'istone H3 (H3R9me2s). Questo anticorpo riconosce specificamente l'arginina 2 simmetricamente dimetilata (H3R2me2s), una modificazione che può svolgere un ruolo nella regolazione epigenetica. Riferimenti correlati: UniProt Q16695

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico simmetricamente dimetilato intorno a R2, garantendo un'elevata specificità per la modificazione H3R2me2s. Durante l'esecuzione del Western blotting, estratti nucleari arricchiti in istoni o istoni estratti con acido possono migliorare il rilevamento.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), le condizioni di recupero dell'antigene e di permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per ogni tipo di tessuto o cellula.
• Negli esperimenti ChIP-seq, considerare l'inclusione di reazioni di controllo come il DNA di input, il controllo IgG e possibilmente la competizione con peptide per confermare la specificità di legame. I controlli "spike-in" possono essere utili per la normalizzazione quantitativa.
• Approcci basati su ELISA possono essere utilizzati per il rilevamento quantitativo dei livelli di H3R2me2s in lisati cellulari o preparazioni di istoni purificati; assicurare un caricamento proteico costante e considerare l'uso di un anticorpo pan-H3 per la normalizzazione.
• È riportata reattività incrociata per umano, topo, ratto e altre specie (ampio spettro previsto). Tuttavia, si raccomanda la validazione nel vostro specifico sistema campione.

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