Anticorpo Policlonale di Coniglio contro Simmetric DiMetil-Istone H3-R8 (Q16695/P68431) per WB, ELISA, ChIP

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA in cromatina, limitando così l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari. Gli istoni svolgono un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM) degli istoni, note anche come "codice degli istoni", e dal rimodellamento dei nucleosomi. Riferimenti correlati: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

L'istone H3.1 canonico (codificato da geni multipli come HIST1H3A-J) è espresso ubiquitariamente, mentre la variante testicolo-specifica H3.1t (codificata da H3-4/HIST3H3) si trova principalmente nelle cellule testicolari. Questo anticorpo è diretto contro la simmetrica dimetilazione all'arginina 8 (R8) dell'istone H3, una modificazione catalizzata dalla protein arginine methyltransferase 5 (PRMT5). La simmetrica dimetilazione in H3R8 è stata implicata nella repressione trascrizionale e nel rimodellamento della cromatina, contribuendo alla regolazione dinamica dell'espressione genica. Riferimenti correlati: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

La modificazione avviene nella coda N-terminale dell'istone H3, una regione ricca di PTM regolatorie tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e altre. L'interazione di questi segni governa la struttura e la funzione della cromatina, rendendo anticorpi sito-specifici come questo anti-simmetric dimetil-H3R8 preziosi per la ricerca epigenetica. Riferimenti correlati: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico simmetricamente dimetilato intorno a R8 dell'istone H3 umano, progettato per riconoscere specificamente il segno di simmetrica dimetilazione. Quando si utilizza questo anticorpo in western blot (WB), considerare che il peso molecolare previsto per l'istone H3 è di circa 15 kDa. Assicurare un'estrazione nucleare completa per una rilevazione ottimale.
• Per l'ELISA, si può utilizzare il rivestimento diretto con il peptide sintetico o estratti di nucleosomi per validare il legame dell'anticorpo. Includere sempre peptidi di controllo appropriati (non modificati, asimmetricamente dimetilati o in altri stati di metilazione) per confermare la specificità.
• Nell'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), questo anticorpo può essere adatto per l'arricchimento di regioni genomiche associate a H3R8 simmetricamente dimetilato. Le condizioni di reticolazione e sonicazione dovrebbero essere ottimizzate per il tipo cellulare specifico e i loci target.
• A causa della prevista ampia reattività incrociata (umano, topo, ratto e altri), si consiglia di validare l'anticorpo nel sistema di campione rilevante prima di esperimenti su larga scala. Variazioni di sequenza specie-specifiche vicino a R8 potrebbero influenzare l'affinità di legame; consultare la sequenza specifica dell'istone H3 per l'organismo di interesse.
• Come per qualsiasi anticorpo specifico per modificazione, può verificarsi variabilità da lotto a lotto. Titolare sempre l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale per il saggio specifico.

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