Anticorpo monoclonale di coniglio Simmetrica DiMetil-Istone H4-R3 (P62805) per la ricerca epigenetica

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Istone H4

L'Istone H4 è uno degli istoni core che costituiscono il nucleosoma eucariotico, attorno al quale il DNA si avvolge per formare la cromatina. Svolge un ruolo fondamentale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. La modificazione dinamica post-traduzionale degli istoni, spesso definita "codice istonico", governa l'accessibilità del DNA alle proteine regolatrici ed è centrale per il controllo epigenetico. Riferimenti correlati: UniProt P62805

L'Istone H4 è localizzato principalmente nel nucleo e si associa ai cromosomi. Durante la spermatogenesi, l'H4 acetilato è localizzato nel nucleo degli spermatidi allo stadio 11. Riferimenti correlati: UniProt P62805

L'Istone H4 subisce estese modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e altre. La dimetilazione simmetrica all'Arg3 (SDMA-H4R3) è catalizzata dalle proteine arginina metiltransferasi PRMT5 e PRMT7 ed è implicata nella regolazione trascrizionale. Riferimenti correlati: UniProt P62805

Altre modificazioni includono la dimetilazione asimmetrica e la citrullinazione all'Arg3, l'acetilazione su più residui di lisina (ad esempio K5, K8, K12, K16) e la fosforilazione su specifici residui di serina e tirosina. Questi marcatori combinati definiscono distinti stati della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:11387442 PMID:11448779 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:21724829 PMID:15592455 PMID:20068231

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre i primi 1-100 amminoacidi N-terminali dell'Istone H4 umano, che include il residuo Arg3 simmetricamente dimetilato. Nella progettazione degli esperimenti, assicurarsi di verificare la specificità dell'anticorpo per questa modificazione utilizzando appropriati controlli di competizione peptidica o mutanti.
• Per Western Blot (WB), si consiglia di utilizzare estratti nucleari di linee cellulari umane o di ratto. Il peso molecolare previsto è di ~11 kDa. Validare la dimensione della banda e la specificità nel proprio sistema di campioni.
• Le applicazioni di immunofluorescenza (IF/ICC) possono richiedere protocolli standard di colorazione nucleare. La co-colorazione con coloranti per il DNA come il DAPI può aiutare a confermare la localizzazione nucleare.
• Dot Blot (DB) e ELISA possono essere utilizzati per quantificare i livelli di Simmetrica dimetil-H4R3 in preparazioni di istoni o lisati cellulari. Questi saggi sono utili per lo screening ad alto rendimento di inibitori o attivatori della metilazione.

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