Anticorpo policlonale rabbit TGF beta 1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01137

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TGF beta 1

• TGF-beta-1 è un membro della famiglia del transforming growth factor beta, sintetizzato come proproteina di 44 kDa che subisce una scissione proteolitica per generare il complesso latente LAP-TGF-beta-1 (PubMed:29109152). Riferimenti correlati: PMID:29109152
• Mantenuto in stato latente nella matrice extracellulare, l'attivazione di TGF-beta-1 è strettamente controllata dal rilascio mediato dalle integrine e dall'interazione con molecole del microambiente come LRRC32/GARP, LRRC33/NRROS e LTBP1 (PubMed:19651619, PubMed:19750484, PubMed:2022183, PubMed:22278742, PubMed:28117447). Riferimenti correlati: PMID:19651619, PMID:19750484, PMID:2022183, PMID:22278742, PMID:28117447
• Dopo l'attivazione, TGF-beta-1 trasmette il segnale attraverso TGFBR1/TGFBR2 per fosforilare SMAD2/3, portando alla traslocazione nucleare e alla regolazione trascrizionale di geni coinvolti nella EMT e nella migrazione cellulare (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809). Riferimenti correlati: PMID:20207738, PMID:25893292, PMID:29483653, PMID:30696809
• TGF-beta-1 svolge un ruolo critico nell'omeostasi immunitaria dirigendo la differenziazione delle cellule T CD4+: alti livelli promuovono lo sviluppo dei Treg, mentre bassi livelli in presenza di IL-6 e IL-21 favoriscono la polarizzazione Th17.
• Nelle ossa e nella cartilagine, TGF-beta-1 stimola l'attività degli osteoblasti e la produzione di collagene, contribuendo al rimodellamento osseo e alla patologia dell'osteoartrite (PubMed:25310401, PubMed:11746498, PubMed:17827158). Riferimenti correlati: PMID:25310401, PMID:11746498, PMID:17827158
• La proteina è secreta nello spazio extracellulare e nella matrice; contiene legami disolfuro, glicosilazione N-linked e un sito di scissione dibasico necessario per l'attivazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 30-280) comprende il dominio LAP, altamente conservato in TGF-beta-1 di uomo, topo e ratto, che supporta la reattività incrociata dichiarata. Confermare la reattività nella specie di interesse se si utilizzano modelli differenti.
• Per Western blot (WB), ci si aspetta pro-TGF-beta-1 a ~44 kDa in condizioni riducenti; la forma matura di ~12,5 kDa può essere rilevata anche in base alla preparazione del campione e allo stato di attivazione. Validare con controlli positivi appropriati.
• Per IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0) e utilizzare un sistema di rivelazione privo di biotina per minimizzare il fondo. Validare la colorazione con controlli isotypici.
• Per IF/ICC, permeabilizzare le cellule (es. 0.1% Triton X-100) e includere un controllo senza anticorpo primario per valutare la specificità.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'abbinamento con un anticorpo di cattura; tenere conto della natura policlonale dell'anticorpo durante lo sviluppo di saggi sandwich.

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