Anticorpo monoclonale di coniglio anti-THOC4/ALYREF per WB, IHC-P, ELISA - Q86V81

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di THOC4/ALYREF

• THOC4/ALYREF (conosciuto anche come ALY, BEF, REF, THOC4) è la subunità 4 del complesso THO, un adattatore per l'esportazione dell'mRNA e un componente chiave del complesso TREX (trascrizione/esportazione), che coordina la trascrizione, l'elaborazione e l'esportazione nucleare dell'mRNA sottoposto a splicing (PubMed:15833825, PubMed:15998806, PubMed:17190602). Riferimenti correlati: PMID:15833825, PMID:15998806, PMID:17190602
• La proteina si lega specificamente all'mRNA sottoposto a splicing a monte del complesso di giunzione esonica (EJC) e viene reclutata in modo dipendente dallo splicing e dal cap, facilitando l'esportazione dell'mRNA attraverso la via TAP/NXF1 (PubMed:15833825, PubMed:15998806, PubMed:17190602). Riferimenti correlati: PMID:15833825, PMID:15998806, PMID:17190602
• THOC4/ALYREF promuove inoltre l'esportazione nucleare di mRNA privi di introni, inclusi l'mRNA HSP70 e gli mRNA contenenti m5C, riconoscendo modifiche specifiche e mediando le interazioni con DDX39B e NXF1-NXT1 (PubMed:17984224, PubMed:19165146, PubMed:28418038). Riferimenti correlati: PMID:17984224, PMID:19165146, PMID:28418038
• Oltre all'esportazione dell'mRNA, agisce come chaperone promuovendo la dimerizzazione dei fattori di trascrizione bZIP, potenziando così l'attivazione trascrizionale, ed è coinvolto nell'allungamento trascrizionale e nella stabilità del genoma (PubMed:10488337, PubMed:12438613). Riferimenti correlati: PMID:10488337, PMID:12438613
• La proteina è localizzata prevalentemente nel nucleo e nelle speckle nucleari, ma può essere presente anche nel citoplasma, riflettendo il suo ruolo dinamico nel trasporto e nel metabolismo delle mRNP.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, citrullinazione, metilazione e fosforilazione, suggerendo meccanismi regolatori che possono modulare la sua attività e le sue interazioni.
• THOC4/ALYREF è espresso in un'ampia varietà di tumori, indicando una potenziale rilevanza nella biologia del cancro e come bersaglio per applicazioni diagnostiche o terapeutiche.
• Nel contesto delle infezioni, il complesso TREX viene dirottato per l'esportazione di mRNA privi di introni di KSHV e THOC4/ALYREF media il reclutamento del complesso sugli mRNA virali, un processo essenziale per la produzione del virus.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 158-257 di THOC4/ALYREF umano. Questa regione può generare un anticorpo in grado di riconoscere sia le forme umane sia quelle dei roditori, come indicato dalla reattività crociata con topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), considerare una diluizione iniziale di 1:1000-1:5000 e validare nel proprio sistema di campioni. È prevista una banda intorno a 27 kDa.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare su sezioni incluse in paraffina con un adeguato recupero antigenico e validare la specificità della colorazione mediante controlli positivi e negativi.
• Per l'ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e la concentrazione dell'anticorpo per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• Il formato monoclonale di coniglio garantisce elevata coerenza e riproducibilità tra gli esperimenti.

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