Topoisomerasi II alfa/TOP2A Coniglio mAb per WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P11388

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Topoisomerasi II Alfa

• La DNA topoisomerasi 2-alfa (TOP2A) è un enzima chiave per la decatenazione che altera la topologia del DNA generando rotture a doppia elica transitorie, facendo passare un filamento integro attraverso la rottura e religandolo. Riferimenti correlati: PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• Questo enzima è essenziale per risolvere i grovigli e i superavvolgimenti del DNA che si verificano durante la replicazione, la trascrizione, la segregazione cromosomica e altri processi che richiedono la manipolazione topologica del DNA.
• TOP2A è un membro della famiglia delle topoisomerasi di tipo II ed esiste come omodimero; è nota anche come isoenzima DNA topoisomerasi II alfa.
• La proteina si localizza nel citoplasma, nel nucleoplasma e nel nucleolo, coerente con i suoi ruoli nel metabolismo del DNA nucleare e nell'organizzazione cromosomica mitotica.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, come indicato dalle parole chiave di UniProt; queste modifiche possono regolare l'attività enzimatica, la stabilità e la localizzazione cellulare.
• TOP2A è ampiamente espressa in tessuti come tonsilla, milza, linfonodo, timo, pelle, pancreas, testicolo, colon, rene, fegato, cervello e polmone. Si osserva un'espressione elevata nei linfomi di alto grado, nei tumori polmonari a cellule squamose e nei seminomi.
• Può svolgere anche un ruolo nella regolazione del ritmo circadiano influenzando la durata del periodo dell'oscillazione trascrizionale di BMAL1 (Per similarità).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato sugli amminoacidi 1431-1531 all'interno della regione C-terminale della TOP2A umana, una regione che può conferire specificità per l'isoforma. Considerare la verifica della specificità tramite controlli di knockdown o knockout.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto della TOP2A è di circa 174 kDa. Utilizzare un gel di acrilamide a bassa percentuale (es. 6-8%) e tempi di trasferimento prolungati per un blotting efficiente di questa proteina ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC-P), sono previsti pattern di colorazione nucleare e nucleolare. Validare confrontando con tessuti positivi noti come tonsilla, milza o linfomi di alto grado.
• Per l'ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento presenti la regione dell'epitopo in modo appropriato; gli assay di competizione peptidica possono aiutare a confermare la specificità di legame.
• Come anticorpo monoclonale ricombinante di coniglio, offre alta affinità e riproducibilità; tuttavia, le diluizioni di lavoro ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente per ogni assay e tipo di campione.

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