mAb coniglio contro TriMetil-Istone H3-K36 (K36me3), Q16695/P68431 – WB, ChIP-seq, IHC-P

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

• L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, avvolge il DNA nella cromatina e svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione e nella stabilità cromosomica. Riferimenti correlati: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431
• La proteina si localizza nel nucleo e sui cromosomi. Riferimenti correlati: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431
• L'istone H3.1t (codificato da H3-4/HIST3H3, accessione Q16695) è specifico del testicolo, mentre l'istone H3.1 canonico (P68431) è espresso in modo ubiquitario.
• La coda N-terminale dell'istone H3 è soggetta a estese modifiche post-traduzionali (PTM), tra cui metilazione, acetilazione, fosforilazione e altre, che costituiscono il "codice dell'istone" che regola la dinamica della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:16267050, PMID:17194708
• La metilazione di residui di lisina come K36 è associata all'allungamento attivo della trascrizione ed è spesso arricchita nei corpi genici. La trimetilazione in K36 (H3K36me3) funge da piattaforma di legame per diverse proteine lettrici coinvolte nella trascrizione e nello splicing. Riferimenti correlati: PMID:16267050
• Questo anticorpo, prodotto contro un peptide sintetico trimetilato attorno a K36, riconosce specificamente la modificazione K36me3, consentendo lo studio dettagliato di questo marchio epigenetico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno di questo anticorpo è un peptide sintetico trimetilato corrispondente ai residui attorno a K36 dell'istone H3 umano. Durante l'esecuzione dei saggi, si consiglia di includere un peptide non metilato o un peptide con uno stato di metilazione diverso come controllo negativo per confermare la specificità.
• Per Western blot (WB), gli istoni estratti con acido o i lisati cellulari totali sono tipi di campione adatti. La dimensione prevista della banda è ~15 kDa. Ottimizzare il caricamento e la diluizione dell'anticorpo per il vostro sistema specifico.
• Questo anticorpo è adatto per ChIP e ChIP-seq; seguire i protocolli standard di preparazione e frammentazione della cromatina e si consiglia di utilizzare controlli spike-in per la normalizzazione.
• La reattività incrociata è prevista per un ampio intervallo di specie oltre a uomo, topo e ratto, grazie all'elevata conservazione della sequenza. Si raccomanda comunque la validazione nella specie di interesse.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene e le condizioni di rilevazione possono richiedere ottimizzazione.

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