Anticorpo Policlonale di Coniglio TriMetil-Istone H3-K56 (Q16695/P68431) per WB, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3 (H3.1/H3.1t)

• L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, avvolge e compatta il DNA in cromatina limitandone l'accessibilità. Svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica.
• L'accessibilità del DNA è governata da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM) sugli istoni, collettivamente indicate come codice istonico. Queste PTM vengono "lette" da proteine effettrici che mediano i cambiamenti dello stato della cromatina e i risultati dell'espressione genica.
• La trimetilazione della lisina 56 (K56me3) è una PTM specifica situata nel dominio globulare di H3. Questa modifica può influenzare le interazioni istono-DNA all'interno del nucleosoma ed è implicata nella risposta al danno del DNA e nella dinamica della cromatina durante la replicazione.
• L'istone canonico H3.1 è espresso ubiquitariamente, mentre la variante H3.1t (codificata da H3-4/HIST3H3) mostra un'espressione specifica per i testicoli.
• Entrambi gli isoformi si localizzano nel nucleo e si associano ai cromosomi, in linea con il loro ruolo strutturale nell'organizzazione della cromatina.

Riferimenti correlati:

• Identificazione di H3K56me3 mediante spettrometria di massa PMID:17194708
• Ruolo di EHMT2 (G9a) nella metilazione di K56 PMID:22387026
• Composizione della particella centrale del nucleosoma e modificazioni istoniche (rassegna) Voce UniProt

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Considerare l'uso di un saggio di competizione con peptidi sia trimetilati che non modificati di K56 per confermare la specificità dell'anticorpo per il marcatore K56me3, specialmente quando si lavora con campioni biologici complessi.
• Per il Western blotting, convalidare la banda osservata al peso molecolare atteso di 15 kDa utilizzando estratti nucleari delle specie di interesse, e includere controlli di caricamento appropriati e marcatori di peso molecolare.
• Negli esperimenti ChIP-seq, includere una reazione di controllo utilizzando un peptide non modificato o un campione bloccato con anticorpo per escludere arricchimenti aspecifici. È prevista una reattività incrociata in un'ampia gamma di specie a causa dell'elevata conservazione della sequenza dell'istone H3, ma si consiglia la convalida sperimentale nella specie bersaglio.
• Per le applicazioni IF/ICC, considerare la co-colorazione con marcatori della cromatina o di specifiche sottostrutture nucleari per confermare la localizzazione spaziale del segnale.

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