Anticorpo policlonale coniglio TriMetil-Istona H3 (K9) - Q16695/P68431 | WB, ChIP, IHC, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della TriMetil-Istona H3-K9

L'istona H3 è un componente principale del nucleosoma, avvolgendo e compattando il DNA in cromatina per limitare l'accessibilità del DNA. Questa compattazione impone un ruolo centrale agli istoni nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata dinamicamente attraverso un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (il "codice degli istoni") e il rimodellamento dei nucleosomi.
Riferimenti correlati: UniProt Q16695 / P68431

L'istona H3 umana esiste come multiple varianti, inclusa la canonica H3.1 dipendente dalla replicazione (codificata da diversi geni come H3C1, H3C2, ecc.; UniProt P68431) e la H3.1t specifica dei testicoli (gene H3-4; UniProt Q16695). Entrambe le varianti condividono una coda N-terminale altamente conservata soggetta a estese modificazioni post-traduzionali.
Riferimenti correlati: UniProt Q16695 / P68431

La trimetilazione della lisina 9 (H3K9me3, corrispondente alla posizione 10 nella sequenza completa UniProt) è una modifica caratteristica frequentemente associata alla formazione di eterocromatina costitutivo, al silenziamento trascrizionale e al reclutamento di HP1 (proteina 1 dell'eterocromatina). Questa modifica è stata documentata in UniProt con ampie prove sperimentali.
Riferimenti correlati: PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

Sia H3.1 che H3.1t si localizzano nel nucleo e si associano ai cromosomi. Mentre H3.1 è ampiamente espressa, l'espressione di H3.1t è limitata alle cellule testicolari.
Riferimenti correlati: UniProt Q16695 / P68431

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico contenente K9 trimetilata; per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali o estratti arricchiti di istoni e convalidare la banda prevista a ~15 kDa.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), progettare primer qPCR per loci noti arricchiti di H3K9me3 (es. ripetizioni pericentromeriche) come controlli positivi; includere una competizione con peptide non modificato per verificare la specificità dell'anticorpo.
• Per l'immunochimica (IHC‑P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissazione, permeabilizzazione e recupero dell'antigene per il campione; si raccomandano tessuti di controllo positivi e negativi (es. testicolo vs. non‑testicolo).
• L'anticorpo è previsto per avere reattività crociata con un'ampia gamma di specie oltre a umano, mouse e ratto; pertanto, si consiglia la convalida nel sistema di campione pertinente.

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