Anticorpo monoclonale coniglio TriMetil-Istone H4-K20 (P62805) per WB, IHC-P, IF/ICC

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H4

L'istone H4 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. Avvolge e compatta il DNA, limitando quindi l'accessibilità ai macchinari cellulari che richiedono il DNA come stampo. Di conseguenza, H4 svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. Riferimenti correlati: UniProt:P62805

La coda N-terminale dell'istone H4, che include la lisina 20 (K20), è soggetta a una vasta gamma di modifiche post-traduzionali—acetilazione, metilazione, fosforilazione e altro—che costituiscono il "codice dell'istone". Queste modifiche regolano dinamicamente la struttura della cromatina e l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:12086618, PMID:17967882

In particolare, la trimetilazione sulla lisina 20 (H4K20me3) è un marcatore epigenetico ben caratterizzato, associato principalmente all'eterocromatina costitutiva, che contribuisce al silenziamento genico e al mantenimento della stabilità genomica. Questa modifica è catalizzata da metiltransferasi come SUV420H1 e SUV420H2. Riferimenti correlati: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882, PMID:32209475

Subcellolarmente, l'istone H4 è localizzato prevalentemente nel nucleo e sui cromosomi. Durante la spermatogenesi, l'H4 acetilato mostra una ritenzione nucleare aumentata negli spermatidi di fase 11. Riferimenti correlati: UniProt:P62805

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché questo anticorpo riconosce un epitopo specifico per la metilazione, assicurarsi che i buffer di blocco e lavaggio mantengano la stabilità dei gruppi metilici. È possibile utilizzare latte scremato in polvere o BSA, ma evitare condizioni di stripping dure che potrebbero alterare la modifica.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare istoni estratti in ambiente acido o lisati arricchiti di nucleo per aumentare il segnale delle modificazioni dell'istone, e di eseguire la corsa su SDS-PAGE ad alta percentuale (15% o gradiente) per una risoluzione ottimale della proteina H4 da 11 kDa.
• Nell'IHC-P, i metodi standard di recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato pH 6.0) sono generalmente compatibili; tuttavia, convalidare su sezioni di tessuto note per esprimere i marcatori H4K20me3, come le regioni eterocromatiche.
• Per applicazioni ELISA o dot blot, includere controlli di peptide non metilato e mono-/di-metilato per confermare la specificità per la trimetilazione.
• Questo formato monoclonale ricombinante di coniglio offre un'elevata riproducibilità per studi a lungo termine; convalidare i fattori di diluizione nel vostro sistema di campioni specifico.

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