Anticorpo Policlonale di Coniglio TriMetil-Istone H4-K20 per WB/IHC/IF (P62805)

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H4

L'istone H4 è uno degli istoni core che costituiscono il nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H2B e H3, forma un ottamero attorno al quale si avvolgono circa 147 paia di basi di DNA, compattando il genoma nel nucleo e regolando l'accessibilità del DNA. L'istone H4 svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. La modulazione dinamica della struttura della cromatina è in gran parte ottenuta attraverso un complesso insieme di modifiche post-traduzionali (PTM) sulle code istoniche, collettivamente denominate "codice istonico". Riferimenti correlati: UniProt P62805

L'istone H4 è localizzato principalmente nel nucleo e si associa ai cromosomi. L'H4 acetilato si trova anche nel nucleo durante specifici stadi della spermatogenesi (spermatidi stadio 11). Riferimenti correlati: UniProt P62805

Il residuo di lisina 20 dell'istone H4 (H4K20) è soggetto a stati di metilazione multipli, inclusi mono-, di- e trimetilazione. La trimetilazione di H4K20 (H4K20me3) è un segno distintivo dell'eterocromatina costitutiva ed è coinvolta nel silenziamento genico, nella risposta al danno del DNA e nella regolazione del ciclo cellulare. Questa modifica è regolata dinamicamente da metiltransferasi (es. SUV4-20H1/2) e demetilasi. Numerose altre PTM su H4 sono state identificate mediante spettrometria di massa e altre tecniche, evidenziando la complessità della regolazione istonica. Riferimenti correlati: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione trimetilata K20 dell'istone H4 umano. Si prevede che questo anticorpo riconosca specificamente H4K20me3, ma la reattività crociata con altri stati di metilazione di H4 o con H4 non modificato dovrebbe essere esclusa sperimentalmente utilizzando saggi di competizione con peptide appropriati o modelli knockout/knockdown.
• Per il rilevamento in Western blot (WB), si consigliano estratti nucleari arricchiti di istoni o istoni estratti con acido come tipo di campione. Ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo primario (es. iniziare con 1:500–1:2000) e utilizzare un coniugato di anticorpo secondario adeguato.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), la recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6.0) o tampone EDTA (pH 8.0) può migliorare la disponibilità dell'epitopo; ottimizzare il metodo di recupero empiricamente.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), si suggerisce la permeabilizzazione con Triton X-100 0.1–0.5% o digitonina. Le condizioni di fissazione (es. PFA 4%) possono influenzare l'accessibilità dell'epitopo; testare diversi protocolli.
• Quando si utilizzano saggi ELISA o dot blot (DB), considerare l'uso di piastre bloccate con BSA e un sistema di rilevamento biotinilato per una maggiore sensibilità.
• Includere sempre un controllo negativo (es. peptide H4 non modificato o controllo IgG) e convalidare la specificità dell'anticorpo nel sistema campione rilevante utilizzando spettrometria di massa o altri metodi ortogonali.
• L'anticorpo mostra una prevista ampia reattività crociata (Umano, Topo, Ratto e altri), ma si consiglia la convalida in ciascuna specie di interesse.

CamelBio: Il Vostro Ponte di Approvvigionamento Tutto-in-Uno

CamelBio fornisce a produttori diagnostici, laboratori di ricerca e sviluppatori IVD un portafoglio completo di materie prime di alta qualità, inclusi coppie di anticorpi convalidate, anticorpi monoclonali e policlonali ottimizzati e reagenti accessori sfusi. Per target di ricerca epigenetica e sulla cromatina come l'istone H4 trimetil K20, offriamo soluzioni di approvvigionamento affidabili per accelerare la vostra pipeline di sviluppo di saggi. Contatta il nostro team per discutere lo sviluppo di anticorpi personalizzati, ordini all'ingrosso o necessità di approvvigionamento per target rari.