Anticorpo policlonale di coniglio anti-ubiquitina per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P0CG47

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'ubiquitina

• L'ubiquitina è codificata dal gene UBB e prodotta come poliubiquitina-B, una proteina precursore che viene processata per generare monomeri maturi di ubiquitina. L'ubiquitina è una proteina altamente conservata di 76 amminoacidi coinvolta nella modificazione post-traduzionale delle proteine bersaglio.
• L'ubiquitina esiste sia legata covalentemente ad altre proteine sia libera (non ancorata). Quando è legata covalentemente, viene coniugata alle proteine bersaglio tramite un legame isopeptidico, formando monomeri (monoubiquitina) o catene di poliubiquitina collegate attraverso diversi residui di Lys (Lys-6, Lys-11, Lys-29, Lys-33, Lys-48, Lys-63) oppure catene lineari collegate tramite la Met iniziatrice.
• Diversi tipi di legame delle catene di poliubiquitina determinano distinti esiti cellulari: le catene legate tramite Lys-48 indirizzano le proteine alla degradazione proteasomica, mentre le catene legate tramite Lys-63 sono coinvolte nell'endocitosi, nelle risposte al danno del DNA e nella segnalazione di NF-kappa-B. Altri tipi di legame (Lys-6, Lys-11, Lys-29, Lys-33) partecipano alla riparazione del DNA, all'ERAD, alla regolazione del ciclo cellulare e alla modificazione delle chinasi.
• Oltre alle forme coniugate, anche le catene libere e non ancorate di poliubiquitina svolgono ruoli nella segnalazione, come l'attivazione delle protein-chinasi e la modulazione di altre vie di segnalazione.
• L'ubiquitina si localizza in diversi compartimenti subcellulari, tra cui il citoplasma, il nucleo e la membrana esterna dei mitocondri, riflettendo il suo ampio coinvolgimento nei processi cellulari.
• Le modificazioni post-traduzionali dell'ubiquitina stessa includono la fosforilazione e l'ADP-ribosilazione, che possono modulare la sua funzione. La proteina contiene un legame isopeptidico e fa parte della via di coniugazione delle Ubl.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende l'ubiquitina a lunghezza intera (amminoacidi 1-228), corrispondente al precursore della poliubiquitina-B. Si prevede che questo anticorpo policlonale riconosca sia l'ubiquitina libera sia le proteine coniugate all'ubiquitina, ma potrebbe anche rilevare le catene di poliubiquitina. Nel WB, considerare l'uso di condizioni denaturanti e riducenti per distinguere l'ubiquitina monomerica dai coniugati di poliubiquitina.
• Per la IHC-P, il recupero antigenico può migliorare la rilevazione; si raccomanda inoltre l'uso di controlli appropriati (ad esempio, campioni sottoposti a knockdown o knockout) per confermare la specificità. Il segnale può essere diffuso a causa dell'ampia distribuzione dell'ubiquitina.
• Nella IF/ICC, è necessario ottimizzare i metodi di fissazione e permeabilizzazione, poiché la localizzazione dell'ubiquitina varia tra i diversi compartimenti. La co-colorazione con marcatori degli organelli può facilitare l'interpretazione.
• I protocolli ELISA devono includere curve standard utilizzando ubiquitina ricombinante per quantificare i livelli di ubiquitina libera o totale. Assicurarsi che l'anticorpo sia validato per il formato specifico del test e per il tipo di campione.
• L'anticorpo mostra un'ampia reattività crociata prevista. Per le specie non umane, validare la reattività nel sistema di campioni pertinente, poiché l'omologia di sequenza è elevata ma può variare.

CamelBio: il vostro punto di riferimento unico per l'approvvigionamento

CamelBio offre una soluzione completa per l'approvvigionamento di materie prime per IVD, supportando produttori di diagnostici, laboratori di ricerca e istituti con coppie di anticorpi validate, anticorpi policlonali e monoclonali ottimizzati, reagenti ancillari sfusi e approvvigionamento di materie prime rare per target specifici. Questo anticorpo anti-ubiquitina supporta la ricerca sulla degradazione delle proteine, sulla segnalazione cellulare e sugli studi dei biomarcatori delle malattie; CamelBio può inoltre assistere nell'aumento della scala produttiva o nella personalizzazione dei materiali per soddisfare le esigenze del vostro progetto, dal concept alla clinica.