Anticorpo Policlonale di Coniglio Ubiquityl-Istone H2A-K119 (P04908/P0C0S8) per WB ed ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H2A Tipo 1

Funzione dell'Istone H2A

L'istone H2A è un componente fondamentale del nucleosoma, avvolgendo e compattando il DNA in cromatina. Questo ruolo strutturale limita l'accessibilità del DNA e regola centralmente la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione del DNA e la stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è modulata attraverso un complesso insieme di modifiche post-traduzionali (PTM) note come "codice istonico" e dal rimodellamento del nucleosoma.

Localizzazione Subcellulare

L'istone H2A si localizza principalmente nel nucleo e si associa ai cromosomi.

Modifiche Post-Traduzionali

L'istone H2A subisce estese PTM, tra cui acetilazione, fosforilazione, citrullinazione e ubiquitinazione. Modifiche specifiche annotate includono:

• Acetilazione N-terminale in Ser-2.
• Fosforilazione in Ser-2 da RPS6KA5.
• Citrullinazione in Arg-4.
• In Lis-119, il residuo bersaglio di questo anticorpo, sono state identificate multiple acilazioni: idrossiisobutirrilazione, beta‑idrossibutirrilazione, crotonilazione e glutarilazione. La parola chiave "Ubl conjugation" in UniProt supporta che l'ubiquitinazione avviene anch'essa in questo sito.

Riferimenti correlati: PMID:11709551, PMID:15823041, PMID:16457589, PMID:15010469, PMID:24681537, PMID:27105115, PMID:21925322, PMID:31542297

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide ubiquitinilato sintetico intorno a K119 di HIST1H2AB umano (UniProt P04908/P0C0S8). Questo design suggerisce specificità per la forma ubiquitinilata; verificare la specificità utilizzando controlli appropriati (ad es. confronto con peptide non modificato o lisati da cellule con ubiquitinazione modulata).
• Per il Western blot (WB), considerare l'estrazione degli istoni utilizzando protocolli di estrazione acida per arricchire le proteine istoniche. Il peso molecolare previsto per la forma non modificata è di circa 14 kDa; l'ubiquitinazione aggiunge ~8.5 kDa, quindi potrebbe essere osservata una banda intorno ai 23 kDa.
• Per l'ELISA, possono essere utilizzati formati diretti o sandwich. Considerare di rivestire con il peptide ubiquitinilato o con istone H2A ubiquitinilato ricombinante per valutare il legame dell'anticorpo.
• Data l'ampia reattività incrociata prevista (Umano, Topo, Ratto e altri), convalidare l'anticorpo nel vostro specifico sistema campione prima di procedere su larga scala.

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