mAb di coniglio anti-UCH37/UCHL5 per WB ed ELISA - Q9Y5K5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di UCH37/UCHL5

• L'idrolasi carbossil-terminale dell'ubiquitina isoforma L5 (UCHL5), nota anche come UCH37, è una tiol-proteasi codificata dal gene UCHL5; appartiene alla famiglia delle idrolasi C-terminali dell'ubiquitina (UCH).
• Funziona come enzima deubiquitinante che scinde specificamente le catene di poliubiquitina legate tramite 'Lys-48', svolgendo un ruolo chiave nella degradazione delle proteine mediante il riciclo dell'ubiquitina prima dell'elaborazione da parte del proteasoma.
• UCHL5 è un componente regolatorio del proteasoma 26S, associato alla particella regolatoria 19S, dove partecipa alla rimozione dell'ubiquitina dai substrati destinati alla degradazione.
• Inoltre, è un componente putativo del complesso di rimodellamento della cromatina INO80; tuttavia, in questo contesto rimane inattivo e si attiva solo in seguito a un'interazione transitoria con il proteasoma attraverso la proteina adattatrice ADRM1.
• A livello subcellulare, UCHL5 si trova sia nel citoplasma sia nel nucleo, coerentemente con il suo coinvolgimento nella degradazione proteasomica e nei processi nucleari quali la riparazione del DNA e la regolazione della trascrizione.
• Lo splicing alternativo e le modificazioni post-traduzionali, inclusa l'acetilazione, possono generare molteplici isoforme, contribuendo alla diversità funzionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si prevede che l'anticorpo rilevi una banda a circa 36–37 kDa; considerare che le modificazioni post-traduzionali (ad es. l'acetilazione) o l'associazione al proteasoma possono causare lievi variazioni della mobilità: validare nel proprio sistema di campioni specifico.
• Grazie alla reattività crociata con campioni umani, murini e di ratto, è possibile testare direttamente UCHL5 endogeno in lisati di queste specie; includere sempre controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'ELISA, l'immunogeno ricombinante (amminoacidi 1–329) può fungere da standard; ottimizzare l'antigene di rivestimento e la concentrazione dell'anticorpo e valutare gli effetti della matrice quando si utilizzano campioni complessi.
• Poiché UCHL5 svolge una funzione nella via ubiquitina-proteasoma, considerare l'uso di inibitori del proteasoma (ad es. MG132) o di modulatori della via dell'ubiquitina nei propri saggi per valutare i cambiamenti dinamici nei livelli o nell'attività di UCHL5.

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