UPF1/RENT1 Rabbit pAb - Q92900

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di UPF1/RENT1

• UPF1 (Regolatore delle trascrizioni nonsense 1), noto anche come RENT1 o hUpf1, è un'elicasi RNA dipendente da ATP e principale regolatore del decadimento dell'mRNA mediato da codoni di stop (NMD), una via di sorveglianza che degrada gli mRNA contenenti codoni di terminazione prematuri. Riferimenti correlati: PMID:11163187 PMID:16086026 PMID:18172165

• L'enzima catalizza l'apertura dipendente da ATP di duplex RNA:DNA, RNA:RNA e DNA:DNA in direzione 5'-3', con il DNA a filamento singolo che stimola fortemente la sua attività ATPasica. Riferimenti correlati: PMID:10999600 PMID:18066079 PMID:21419344 PMID:23275559 PMID:26138914 PMID:30218034

• Alla terminazione della traduzione, UPF1 viene reclutato ai ribosomi bloccati e cicla tra stati fosforilati e defosforilati; la sua fosforilazione da parte di SMG1 è un interruttore critico che innesca l'NMD. Riferimenti correlati: PMID:11544179 PMID:19417104 PMID:25220460

• Nella via canonica dipendente da EJC, UPF1 si assembla in un complesso eterotrimero SURF e poi con UPF2/UPF3 per formare il complesso di sorveglianza attivo, che dirige gli mRNA bersaglio verso il decadimento esonucleolitico ed endonucleolitico. Riferimenti correlati: PMID:21419344 PMID:12554878

• UPF1 opera inoltre in vie NMD alternative indipendentemente da UPF2/UPF3 e media il decadimento dell'mRNA degli istoni dipendente dalla replicazione alla fine della fase S. Riferimenti correlati: PMID:16086026 PMID:18172165 PMID:18447585

• La proteina localizza nel citoplasma, nei corpi di elaborazione (P-bodies), nel nucleo e nella regione perinucleare.

• UPF1 è espresso ubiquitariamente, contiene domini a dito di zinco ed è soggetto a modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, metilazione e isomerizzazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 819–1118), ci si aspetta che l'anticorpo riconosca tutte le isoforme UPF1 ed è adatto per rilevare le varianti a lunghezza intera e troncate in WB e IP.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 124 kDa; utilizzare condizioni riducenti e validare con appropriati controlli positivi (es. HeLa, HEK293) e negativi.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, UPF1 mostra tipicamente un pattern citoplasmatico diffuso e nucleare punteggiato; le condizioni di permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione.
• La reattività incrociata riportata con topo e ratto rende questo anticorpo utile per studi su modelli roditori, ma si raccomanda la validazione nel sistema di campioni specifico.
• Per le applicazioni ELISA e IP, la natura policlonale può fornire un'elevata sensibilità, sebbene sia consigliabile la titolazione e l'ottimizzazione del blocco.

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