Anticorpo policlonale coniglio USP10 per WB, IF/ICC, ELISA - Q14694

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di USP10

• USP10 (Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 10) è una tiol proteasi che agisce come enzima deubiquitinante, rimuovendo l'ubiquitina da vari substrati per regolare la stabilità proteica, la segnalazione cellulare e il traffico di membrana. Riferimenti correlati: PMID:11439350 PMID:18632802 PMID:31981475

• Nelle cellule non sottoposte a stress, USP10 si localizza nel citoplasma, dove deubiquitina specificamente e stabilizza p53/TP53 contrastando la degradazione mediata da MDM2. In seguito a danno del DNA, USP10 trasloca nel nucleo per continuare la deubiquitinazione di p53 e facilitare la risposta al danno del DNA. Riferimenti correlati: PMID:20096447

• USP10 controlla l'autofagia deubiquitinando BECN1, un regolatore chiave dell'autofagia, stabilizzando così i complessi PIK3C3/VPS34. Questo crea un ciclo regolatorio in cui i complessi PIK3C3/VPS34, a loro volta, regolano la stabilità di USP10, influenzando i livelli di p53. Riferimenti correlati: PMID:21962518

• USP10 svolge un ruolo critico nel controllo di qualità dei ribosomi e nella dinamica dei granuli di stress. Inibisce l'assemblaggio dei granuli di stress riducendo la valenza di G3BP1/2 e media la deubiquitinazione delle proteine ribosomali 40S (RPS2, RPS3, RPS10) per promuovere il riciclo delle subunità dopo l'arresto della traduzione. Riferimenti correlati: PMID:27022092 PMID:32302570 PMID:31981475 PMID:34348161 PMID:34469731

• USP10 deubiquitina CFTR negli endosomi precoci, aumentandone il riciclo endocitico e l'espressione sulla superficie cellulare. Riferimenti correlati: PMID:19398555

• USP10 agisce come regolatore negativo della segnalazione di NF-κB deubiquitinando IKBKG o TRAF6 in risposta a IL-1β o danno del DNA, e blocca anche l'attivazione di MAVS mediata da RIG-I durante l'infezione da virus a RNA rimuovendo la poliubiquitina legata a K63 non ancorata da MAVS. Riferimenti correlati: PMID:25861989 PMID:37582970

• USP10 è ampiamente espresso e si localizza nel citoplasma, nel nucleo e negli endosomi precoci. Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, mentre lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 499–798) di USP10 umano. Questa regione può riconoscere più isoforme derivate dallo splicing alternativo.
• Per Western blotting, il peso molecolare previsto è ~87 kDa; verificare la specificità della banda con controlli appropriati, specialmente in campioni con processi di deubiquitinazione attivi.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), si ricorda che USP10 si sposta tra citoplasma e nucleo. Si consiglia di utilizzare la frazionamento cellulare o protocolli di fissazione/permeabilizzazione accuratamente ottimizzati per catturare entrambe le localizzazioni.
• L'anticorpo è validato per WB, IF/ICC e ELISA. Ottimizzare empiricamente le diluizioni di lavoro per ogni applicazione e tipo di campione.
• Poiché USP10 è coinvolto nelle risposte allo stress (es. danno del DNA, arresto dei ribosomi), includere controlli positivi e negativi appropriati nei tuoi esperimenti.

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