XBP1 Anticorpo policlonale di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P17861

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di XBP1

• XBP1 esiste in due isoforme principali: la forma non splicata (XBP1u) agisce come fattore di trascrizione debole e regola principalmente la risposta alle proteine unfolded (UPR) tramite feedback negativo, mentre la forma splicata (XBP1s) è un potente attivatore trascrizionale dei geni bersaglio della UPR. Riferimenti correlati: PMID:8657566 PMID:16461360 PMID:11779464 PMID:25239945
• XBP1 è centrale nella risposta alle proteine unfolded (UPR), si lega all'elemento di risposta allo stress del RE (ERSE) e all'elemento UPR (UPRE) per sovraregolare le chaperoni del RE e le componenti della degradazione associata al RE. Riferimenti correlati: PMID:11779464 PMID:25239945
• La produzione di XBP1s attivo prevede lo splicing citoplasmatico non convenzionale dell'mRNA di XBP1 da parte dell'endoribonucleasi IRE1α (ERN1) in condizioni di stress del reticolo endoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:19394296 PMID:21233347 PMID:23529610
• XBP1u fornisce feedback negativo indirizzando XBP1s alla degradazione mediata dal proteasoma, prevenendo l'iperattivazione della UPR. Riferimenti correlati: PMID:16461360 PMID:25239945
• XBP1 si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico e si sposta nel nucleo dopo l'attivazione; è presente anche nel citoplasma.
• Nelle cellule immunitarie, XBP1 è essenziale per la differenziazione delle plasmacellule e la produzione di immunoglobuline, ed è espresso nella sinovia reumatoide. Riferimenti correlati: PMID:11460154
• XBP1 contribuisce alla progressione tumorale: la sua sovraespressione nel cancro al seno promuove la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) e la metastasi tramite la sovregolazione di SNAI1. Riferimenti correlati: PMID:25280941
• Nelle cellule endoteliali, XBP1 promuove l'angiogenesi e la proliferazione indotte da VEGF e regola l'autofagia tramite l'attivazione trascrizionale di BECN1. Riferimenti correlati: PMID:23529610 PMID:23184933 PMID:19416856

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Sulla base della progettazione dell'immunogeno (proteina ricombinante/peptide sintetico corrispondente agli aa. 277–376 di XBP1 umano), l'anticorpo può riconoscere entrambe le isoforme non splicata (~29 kDa) e splicata (~55 kDa); si consiglia la convalida con controlli specifici per isoforma o l'induzione dello stress del RE (ad es. tunicamicina).
• Per il Western blot (WB) con questo anticorpo policlonale di coniglio, separare le proteine in condizioni riducenti e aspettarsi una banda vicino a 29 kDa per XBP1u; l'induzione dello stress del RE può spostare il segnale verso la forma splicata più grande.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare la fissazione (ad es. 4% PFA) e la permeabilizzazione (ad es. 0,1% Triton X-100) per mantenere la localizzazione nel RE e nel nucleo; eseguire la co-colorazione con marcatori di organelli per confermare la distribuzione subcellulare.
• Per l'ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento contro la proteina XBP1 ricombinante o i lisati cellulari; le condizioni di titolazione e bloccaggio devono essere ottimizzate per il singolo saggio.
• La reattività crociata con topo e ratto è riportata; tuttavia, l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno deve essere verificata per il tuo modello sperimentale specifico.

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