YKL-40/CHI3L1 pAb di coniglio - P36222

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di YKL-40/CHI3L1

• CHI3L1 (proteina 1 simile alla chitinasi-3), nota anche come YKL-40, GP-39, CGP-39 o HC-gp39, è una glicoproteina secreta appartenente alla famiglia delle glicosil idrolasi 18, ma priva di attività catalitica chitinasi.
• Funziona come lectina legante i carboidrati con preferenza per la chitina e svolge un ruolo chiave nel rimodellamento tissutale e nell'adattamento cellulare ai cambiamenti ambientali, in particolare nelle condizioni infiammatorie.
• CHI3L1 è coinvolta nelle risposte infiammatorie delle cellule T helper di tipo 2 (Th2) e nell'infiammazione indotta da IL-13, regolando la sensibilizzazione agli allergeni, l'apoptosi delle cellule infiammatorie, l'accumulo delle cellule dendritiche e la differenziazione dei macrofagi M2.
• Nel polmone, CHI3L1 regola le risposte antibatteriche contribuendo all'eliminazione batterica da parte dei macrofagi, controllando la disseminazione batterica e aumentando la tolleranza dell'ospite. Inoltre, media il danno, l'infiammazione e l'apoptosi epiteliale indotti dall'iperossia.
• A livello subcellulare, CHI3L1 viene secreta principalmente nello spazio extracellulare, ma può essere rilevata anche nel citoplasma, nella regione perinucleare e nel reticolo endoplasmatico.
• L'espressione tissutale è prominente nei macrofagi attivati, nei condrociti articolari, nelle cellule sinoviali e nel fegato. L'espressione è molto bassa o non rilevabile nel colon non infiammato, nei muscoli, nei polmoni, nel pancreas, nelle cellule mononucleate e nei fibroblasti.
• La proteina è soggetta a glicosilazione e contiene un peptide segnale e ponti disolfuro, che possono influenzarne il peso molecolare apparente su SDS-PAGE (~43 kDa, superiore ai 42,6 kDa previsti).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 22–220, coprendo la forma matura secreta; si prevede che l'anticorpo rilevi CHI3L1 endogena in campioni umani, murini e di ratto.
• Per il western blot, si osserva tipicamente una banda intorno a 43 kDa. La glicosilazione e altre modifiche possono causare lievi variazioni; se è necessaria una conferma precisa della massa, si consiglia di eseguire una validazione con enzimi deglicosilanti.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), può essere necessario il recupero antigenico. I controlli positivi includono tessuto sinoviale infiammato, fegato o campioni ricchi di macrofagi attivati.
• Per IF/ICC, la localizzazione cellulare (secreta/citoplasmatica) deve essere confermata utilizzando protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione. La co-colorazione con marcatori degli organelli può aiutare a verificare la localizzazione perinucleare o nel reticolo endoplasmatico.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per quantificare CHI3L1 nei fluidi biologici (siero, plasma, surnatanti di coltura); se si sta sviluppando un ELISA sandwich, si consiglia di abbinarlo a un anticorpo di rilevazione compatibile.
• Validare sempre l'anticorpo nel proprio specifico sistema di campioni e nelle condizioni del saggio, poiché le prestazioni possono variare in funzione delle modifiche post-traduzionali e dei livelli di espressione.

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