YY1 Rabbit pAb per WB, ELISA, ChIP - P25490

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di YY1

• YY1 (Yin Yang 1), noto anche come fattore di trascrizione Delta, NF-E1, INO80S e UCRBP, è un fattore di trascrizione multifunzionale che presenta funzioni sia di repressore che di attivatore a seconda del contesto del promotore e dei co-fattori interagenti.
• Si lega alla sequenza di consenso del DNA 5'-CCGCCATNTT-3' vicino ai siti di inizio della trascrizione; la metilazione del dinucleotide CG iniziale riduce notevolmente l'affinità di legame. Riferimenti correlati: PMID:15329343 PMID:17721549 PMID:24326773
• In assenza della proteina E1A dell'adenovirus, YY1 agisce come un repressore, ma in sua presenza, passa ad attivatore, dimostrando la sua regolazione trascrizionale dipendente dal contesto. Riferimenti correlati: PMID:1655281
• YY1 agisce in sinergia con SMAD1 e SMAD4 nell'espressione genica specifica cardiaca mediata dalla proteina morfogenetica ossea (BMP) legandosi agli elementi di legame SMAD all'interno degli elementi di risposta BMP. Riferimenti correlati: PMID:15329343
• Recluta il complesso PRC2/EED-EZH2 per mediare la repressione trascrizionale e interagisce anche con il complesso PR-DUB, mirando a specifiche regioni di regolazione genica per la deubiquitinazione. Riferimenti correlati: PMID:11158321 PMID:20805357
• YY1 è proposto come componente principale del complesso di rimodellamento della cromatina INO80 ed è coinvolto nella riparazione del DNA, con legame in vitro agli intermedi di ricombinazione delle giunzioni di Holliday. Riferimenti correlati: PMID:18026119 PMID:28575647
• A livello subcellulare, YY1 si localizza alla matrice nucleare, coerentemente con il suo ruolo nella regolazione trascrizionale e nell'organizzazione della cromatina.
• Le modifiche post-traduzionali di YY1 includono la fosforilazione, l'ADP-ribosilazione e l'ubiquitinazione; la proteina contiene domini a dito di zinco multipli essenziali per il legame al DNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno che mira agli amminoacidi 80–160 di YY1 umano potrebbe rilevare sia le isoforme a lunghezza intera che quelle troncate; convalidare il pattern di bande osservato nel sistema di campioni specifico.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~45 kDa; ottimizzare le condizioni di blocco e la diluizione dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari totali di cellule umane, del mouse o del ratto.
• Negli saggi ChIP, includere loci di controllo positivi e negativi appropriati (ad es., promotori bersaglio noti di YY1 rispetto a regioni intergeniche) e confermare l'arricchimento con qPCR.
• Quando si utilizza l'ELISA, considerare i test di reattività crociata con altri fattori di trascrizione a dito di zinco se si osservano segnali aspecifici.

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