Anticorpo policlonale Anti-CFI per WB ed ELISA - P05156

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CFI

• La CFI è una serina proteasi simile alla tripsina che regola negativamente tutte le vie del complemento clivando le catene alfa di C3b e C4b, inattivando così questi principali opsonine.
  Riferimenti correlati: PMID:17320177 PMID:7360115
• Richiede cofattori per l'attività, inclusi il fattore H e C4BP in fase fluida, e la proteina cofattrice di membrana (CD46) e il recettore 1 del complemento (CR1) sulle superfici cellulari.
  Riferimenti correlati: PMID:12055245 PMID:2141838 PMID:9605165
• Sulle cellule ospiti sane, la degradazione mediata dalla CFI del C3b depositato previene l'attivazione autologa del complemento, mentre sulle cellule apoptotiche o sui microbi privi di cofattori protettivi, il C3b rimane attivo per promuovere l'opsonizzazione e la clearance.
  Riferimenti correlati: PMID:28671664
• La CFI è espressa principalmente nel fegato dagli epatociti, ma si trova anche nei monociti, nei fibroblasti e nei cheratinociti.
  Riferimenti correlati: PMID:6327681 PMID:17320177 PMID:6444659
• La proteina viene secreta nello spazio extracellulare e circola nel sangue, esercitando la sua funzione regolatoria in fase fluida e sulle superfici cellulari.
• La CFI contiene legami disolfuro, siti di glicosilazione e motivi di legame del calcio; è classificata tra le serine proteasi ed è coinvolta nell'immunità innata. Le mutazioni sono associate alla degenerazione maculare legata all'età e alla sindrome emolitico-uremica.
• La proteina ha una massa molecolare prevista di ~66 kDa e subisce glicosilazione N-legata.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 19-300) copre la porzione N-terminale della CFI umana, riconoscendo probabilmente sia la pro‑CFI che la catena pesante matura; tenere conto di ciò nell'interpretazione dei pattern di bande.
• Per il Western blot, la diluizione iniziale raccomandata è tipicamente 1:500–1:2000; dovrebbe essere osservata una banda prevista vicino a 66 kDa in condizioni riducenti, con possibili bande aggiuntive dovute alla glicosilazione o al processamento.
• Per l'ELISA, le condizioni di test richiedono ottimizzazione; l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione dell'antigene, ma validare l'abbinamento con un anticorpo complementare se si utilizza un formato sandwich.
• Quando si analizzano campioni di topo, verificare la reattività; sebbene la reattività crociata sia indicata, l'intensità del segnale potrebbe differire dalla CFI umana.
• Includere sempre appropriati controlli positivi e negativi, come lisati di cellule che esprimono CFI (es. linee cellulari derivate da epatociti) e siero privo di CFI.

CamelBio: Il tuo ponte di approvvigionamento tutto-in-uno

CamelBio fornisce ai produttori di diagnostica, ai laboratori e agli istituti di ricerca un accesso tutto-in-uno a materie prime IVD, servizi tecnici e consulenza, coprendo ogni fase dal concetto alla clinica. Per la ricerca sul complemento e lo sviluppo di saggi, CamelBio può approvvigionare coppie di anticorpi convalidati, anticorpi policlonali ottimizzati, reagenti ausiliari in blocco e materie prime per target rari per ottimizzare il flusso di lavoro.