Anticorpo monoclonale anti-DNA Ligasi III/LIG3 per WB, IHC-P, ELISA - P49916

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della DNA Ligasi III/LIG3

• La DNA ligasi 3 (LIG3) codifica diverse isoforme: l'isoforma 3 forma un eterodimero con XRCC1 nel nucleo per correggere i difetti nella riparazione delle rotture dei filamenti di DNA e nello scambio tra cromatidi fratelli dopo l'esposizione a radiazioni ionizzanti e agenti alchilanti, mentre l'isoforma 1 è indirizzata ai mitocondri e svolge un ruolo nella riparazione del DNA mitocondriale mediante escissione di basi. Riferimenti correlati: PMID:10207110 PMID:24674627
• La proteina contiene motivi essenziali a dita di zinco e appartiene alla famiglia delle DNA ligasi ATP-dipendenti, svolgendo ruoli chiave nella ricombinazione, replicazione e riparazione del DNA.
• LIG3 è localizzata sia nel nucleo sia nei mitocondri, supportando la sua duplice funzione nel mantenimento dell'integrità genomica e mitocondriale.
• È una fosfoproteina con ruoli regolatori durante il ciclo cellulare, in particolare nella divisione cellulare e nella replicazione del DNA.
• Un'elevata espressione è osservata nei testicoli, nel timo, nella prostata e nel cuore, indicando esigenze di riparazione del DNA specifiche dei tessuti.
• Le mutazioni in LIG3 sono associate alla sindrome da deplezione del DNA mitocondriale 20 (MTDPS20), una malattia mitocondriale primaria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 400–500) si trova all'interno di una regione conservata; si prevede una reattività crociata con topo e ratto sulla base dell'omologia di sequenza, ma si raccomanda la validazione nel sistema di campioni pertinente.
• Per il Western blot, si prevede una banda a circa 113 kDa; si consiglia di utilizzare un gel a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per un trasferimento efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Per IHC-P, ottimizzare il recupero antigenico utilizzando il recupero dell'epitopo indotto dal calore (ad es. tampone citrato pH 6,0 o tampone EDTA pH 9,0) e validare con controlli tissutali appropriati.
• I protocolli ELISA possono utilizzare il rilevamento diretto o indiretto; l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento validato diretto contro un epitopo diverso può aumentare la sensibilità del saggio.

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