Anticorpo policlonale coniglio Anti-DNA Ligasi III/LIG3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49916

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della DNA Ligasi III

• La DNA ligasi 3 (LIG3) esiste in più isoforme: l'isoforma 3 (nucleare) e l'isoforma 1 (mitocondriale), con nomi alternativi tra cui LIG2, LIG3alpha e MTDPS20.
• L'isoforma 3 (nucleare) forma un eterodimero con XRCC1 e partecipa alla riparazione delle rotture del filamento di DNA e alla correzione degli scambi tra cromatidi fratelli dopo danni da radiazioni ionizzanti e agenti alchilanti. Riferimenti correlati: PMID:10207110 | PMID:24674627
• L'isoforma 1 (mitocondriale) funziona come DNA ligasi nella riparazione mitocondriale dell'escissione di basi (mtBER), un processo fondamentale per mantenere l'integrità del genoma mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:10207110 | PMID:24674627
• La localizzazione subcellulare è sia nucleare che mitocondriale, in linea con il suo doppio ruolo nel mantenimento del DNA genomico e mitocondriale.
• È espressa principalmente in testicolo, timo, prostata e cuore, che corrispondono a tessuti con un elevato fabbisogno metabolico o proliferativo.
• Contiene un dominio di legame per l'ATP, due motivi a dito di zinco e richiede magnesio come cofattore per la sua attività di ligasi dipendente dall'ATP.
• Le mutazioni geniche sono associate alla sindrome da deplezione del DNA mitocondriale tipo 20 (MTDPS20), una malattia mitocondriale primaria, che sottolinea la sua funzione mitocondriale essenziale.
• È coinvolto in processi cellulari più ampi tra cui replicazione del DNA, ricombinazione e progressione del ciclo cellulare, collegando la riparazione del DNA alla stabilità del genoma.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 254–460, una regione conservata in entrambe le isoforme nucleare e mitocondriale; pertanto, l'anticorpo può riconoscere entrambe le forme.
• Per il Western blotting, è previsto una banda dominante vicino a 113 kDa; includere controlli positivi appropriati (ad es. lisato di HeLa, HEK293 o testicolo) e convalidare nel sistema di campioni pertinente.
• Nell'IHC-P, considerare i metodi di recupero dell'antigene e i modelli di espressione tessuto-specifici; testicolo, timo, prostata e cuore sono tessuti positivi adatti.
• La reattività incrociata con topo e ratto consente l'applicazione nei comuni organismi modello; tuttavia, verificare la reattività specie-specifica nella vostra configurazione sperimentale.
• La natura policlonale può offrire un segnale robusto, ma la coerenza tra lotti deve essere valutata per saggi quantitativi.
• Per ELISA e IF/ICC, ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario e le condizioni di rilevazione utilizzando controlli positivi e negativi noti.

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