Anticorpo policlonale di coniglio anti-DNA ligasi III/LIG3 per WB, IP, ELISA - P49916

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della DNA ligasi III

• La DNA ligasi 3 (LIG3), nota anche come DNA ligasi III o poli-deossiribonucleotide sintetasi [ATP] 3, è una DNA ligasi ATP-dipendente fondamentale per la riparazione e la ricombinazione del DNA.
• L'isoforma 3 funziona come eterodimero con XRCC1 nel nucleo, correggendo i difetti nella riparazione delle rotture dei filamenti di DNA e nello scambio tra cromatidi fratelli in seguito a radiazioni ionizzanti o al trattamento con agenti alchilanti. Riferimenti correlati: PMID:10207110 PMID:24674627
• L'isoforma 1 si localizza nei mitocondri, dove svolge il ruolo di DNA ligasi nella riparazione per escissione di basi mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:10207110 PMID:24674627
• La proteina contiene un dominio di legame all'ATP, un motivo a dita di zinco e un nucleo catalitico conservato, che consentono la sua attività ligasica in modo dipendente da ATP e magnesio.
• L'espressione di LIG3 è rilevata nei testicoli, nel timo, nella prostata e nel cuore, riflettendo ruoli specifici dei tessuti nel mantenimento del DNA.
• La localizzazione subcellulare comprende sia il nucleo sia i mitocondri, mediata dall'inizio alternativo della traduzione e da un peptide di transito mitocondriale nell'isoforma 1.
• Modifiche post-traduzionali come la fosforilazione regolano l'attività di LIG3 e le mutazioni sono associate a malattie mitocondriali primarie.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 113 kDa. Utilizzare marcatori proteici appropriati e condizioni riducenti; valutare la convalida in lisati cellulari umani o murini.
• Nell'immunoprecipitazione, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di lavaggio per catturare i complessi endogeni di LIG3, tenendo conto della sua interazione con XRCC1 negli estratti nucleari.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento diretto o indiretto; assicurarsi che l'antigene di rivestimento corrisponda alla regione dell'immunogeno (amminoacidi 730-1009).
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, può riconoscere più isoforme; verificare la specificità con controlli appropriati o linee cellulari knockout qualora sia necessaria la discriminazione tra isoforme.

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