Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-DNA Ligasi IV per WB, ELISA - P49917

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della DNA Ligasi IV

• La DNA ligasi 4 (LIG4), nota anche come DNA ligasi IV, è una DNA ligasi ATP-dipendente essenziale per la riparazione delle rotture a doppio filamento del DNA (DSB) tramite giunzione non omologa delle estremità (NHEJ) e per la ricombinazione V(D)J. Ricuce le estremità del DNA rotto dopo il riempimento del gap. (PMID:12517771, PMID:17290226, PMID:9242410) Riferimenti correlati: PMID:12517771 PMID:17290226 PMID:9242410
• La LIG4 forma un complesso con XRCC4, che stimola la sua attività di ligazione e consente la riparazione di varie configurazioni di estremità del DNA, inclusi nick, estensioni compatibili e gap con micro-omologia. (PMID:17290226, PMID:9242410, PMID:9809069) Riferimenti correlati: PMID:17290226 PMID:9242410 PMID:9809069
• La ligazione da parte del complesso LIG4-XRCC4 dipende dal complesso DNA-PK per il legame alle estremità del DNA, coordinando la riparazione NHEJ. (PMID:10854421) Riferimenti correlati: PMID:10854421
• La LIG4 è localizzata esclusivamente nel nucleo, coerente con il suo ruolo nel mantenimento del genoma.
• L'espressione tissutale della LIG4 è più alta nei testicoli, timo, prostata e cuore, corrispondente a tessuti con processi attivi di ricombinazione e riparazione.
• La proteina appartiene alla famiglia delle DNA ligasi e contiene domini conservati per il legame dell'ATP e la coordinazione dei metalli (magnesio), fondamentali per la sua funzione catalitica.
• Le mutazioni nella LIG4 sono associate a varianti patologiche, inclusa l'immunodeficienza combinata grave (SCID), sottolineandone l'importanza nello sviluppo immunitario.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato utilizzando un immunogeno ricombinante che copre gli amminoacidi 504-685 della LIG4 umana, una regione all'interno del dominio catalitico centrale. Per il Western blot, considerare condizioni riducenti e un controllo positivo come lisati cellulari HeLa o Jurkat; il peso molecolare atteso è di circa 104 kDa.
• Nelle applicazioni ELISA, convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando la proteina LIG4 ricombinante o un rivestimento peptidico, e ottimizzare le condizioni di rilevamento per i campioni umani.
• Data l'origine da coniglio, utilizzare un appropriato anticorpo secondario anti-coniglio coniugato a HRP o altri enzimi di rilevamento.
• È stata riportata reattività crociata per l'umano; quando si applica ad altre specie, eseguire un allineamento delle sequenze e test preliminari.
• L'anticorpo viene confezionato e spedito su sacchetti di ghiaccio; conservare come raccomandato per mantenerne la stabilità.

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