Anticorpo policlonale coniglio anti-DNA Ligase IV per WB, IHC-P, ELISA - P49917

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della DNA Ligase IV

• La DNA ligasi 4 (LIG4), nota anche come DNA ligasi IV o polidesossiribonucleotide sintasi [ATP] 4, è codificata dal gene LIG4 ed è un membro della famiglia delle DNA ligasi dipendenti da ATP.
• LIG4 catalizza il passaggio finale di legazione nella giunzione di estremità non omologa (NHEJ), una via essenziale per la riparazione delle rotture a doppia elica del DNA (DSB) e per la ricombinazione V(D)J durante lo sviluppo immunitario. Riferimenti correlati: PMID:12517771, PMID:17290226, PMID:23523427, PMID:9242410
• LIG4 forma un subcomplesso stretto con la proteina impalcatura XRCC4, che stimola marcatamente la sua attività di legazione; il complesso LIG4-XRCC4 può sigillare i nick a filamento singolo e, con minore efficienza, unire estremità che presentano microomologia di 2 nucleotidi o gap di 1 nucleotide. Riferimenti correlati: PMID:17290226, PMID:9242410, PMID:9809069
• Il caricamento efficiente del complesso LIG4-XRCC4 sulle rotture del DNA richiede l'assemblaggio dell'oloenzima chinasi dipendente dal DNA (DNA-PK) sul sito del danno. Riferimenti correlati: PMID:10854421
• LIG4 regola anche l'accumulo nucleare di XRCC4, sottolineando un'interazione dinamica che localizza la macchinaria NHEJ ai siti di danno del DNA. Riferimenti correlati: PMID:24984242
• La proteina è prevalentemente nucleare, coerente con la sua funzione nella riparazione del DNA genomico, ed è espressa ai livelli più alti nei testicoli, timo, prostata e cuore.
• Con una massa molecolare prevista di ~104 kDa, LIG4 contiene motivi conservati per il legame dell'ATP, il coordinamento del magnesio/metallo e ripetizioni BRCT in tandem che mediano le interazioni proteina-proteina nei complessi di riparazione del DNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è un frammento ricombinante che copre gli amminoacidi 1–210 della LIG4 umana (NP_002303.2); nella progettazione degli esperimenti, considerare che questa regione N‑terminale può essere conservata tra le specie, supportando la cross‑reattività osservata.
• Le applicazioni validate includono il western blotting (WB), l'immunoistochimica su sezioni paraffinate (IHC-P) e l'ELISA; per il WB, il peso molecolare previsto è di circa 104 kDa—validare sempre la rilevazione nel lisato cellulare o tissutale rilevante.
• La cross‑reattività è riportata per umano, topo e ratto; per esperimenti in altre specie, valutare l'omologia di sequenza della regione immunogenica e includere i controlli appropriati per confermare la specificità.

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