Anticorpo policlonale di coniglio contro la subunità 4 della DNA polimerasi delta (POLD4/p12) per WB, ELISA - Q9HCU8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della subunità 4 della DNA polimerasi delta (POLD4)

• La subunità 4 della DNA polimerasi delta (POLD4), nota anche come p12 o POLDS, è un componente del complesso tetramerico della DNA polimerasi delta (Pol-delta4). Questo complesso svolge un ruolo centrale nella replicazione e nella riparazione ad alta fedeltà del DNA genomico. Riferimenti correlati: PMID:16510448, PMID:19074196, PMID:20334433
• All'interno di Pol-delta4, POLD4 aumenta la velocità di sintesi del DNA diminuendo la fedeltà, regolando l'attività polimerasica e l'esonucleasi di correzione di bozza 3'→5' della subunità catalitica POLD1. Riferimenti correlati: PMID:16510448, PMID:19074196, PMID:20334433
• POLD4 partecipa alla maturazione dei frammenti di Okazaki durante la sintesi del DNA del filamento ritardato, facilitando sia la via di scissione del lembo corto sia un sistema di nick translation. Riferimenti correlati: PMID:24035200
• In condizioni di stress della replicazione del DNA, POLD4 è necessaria per la riparazione delle forcelle di replicazione rotte tramite la replicazione indotta da rottura (BIR), un meccanismo che può generare duplicazioni genomiche segmentali fino a 200 kb. Riferimenti correlati: PMID:24310611
• POLD4 è coinvolta nella sintesi translesione (TLS) attraverso lesioni del DNA come O6-metilguanina e siti abasici, consentendo alla replicazione di bypassare determinati tipi di danno. Riferimenti correlati: PMID:19074196
• In risposta al danno del DNA, POLD4 viene indirizzata alla degradazione, un processo fondamentale per l'inibizione della progressione della forcella e la promozione della sopravvivenza cellulare. Questa degradazione è probabilmente mediata dall'ubiquitinazione. Riferimenti correlati: PMID:24022480
• POLD4 è localizzata nel nucleo, in linea con le sue funzioni essenziali nella replicazione e nella riparazione del DNA.
• POLD4 è caratterizzata da parole chiave che includono splicing alternativo, danno del DNA, riparazione del DNA, replicazione del DNA e coniugazione Ubl, che riflettono il suo ruolo multifacetato nel mantenimento della stabilità genomica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 1–107 della POLD4 umana, che rappresenta la proteina full-length. Questo progetto dovrebbe generare anticorpi in grado di riconoscere la conformazione nativa di POLD4.
• Per l'analisi Western blot (WB), utilizzare una linea cellulare umana nota per esprimere POLD4; il peso molecolare previsto è di circa 12 kDa. Tenere presente che modifiche post-traduzionali o la formazione di complessi proteici possono causare lievi spostamenti nella migrazione.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, questo reagente lega probabilmente più epitopi, fornendo un segnale robusto anche in presenza di variazioni minori di sequenza. Tuttavia, la reattività crociata con ortologhi di altre specie deve essere determinata empiricamente.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato in formati diretti, indiretti o sandwich. Le diluizioni di lavoro ottimali e le condizioni di analisi devono essere ottimizzate dall'utente finale.
• Poiché POLD4 funziona come parte di un complesso a più subunità, si consiglia di eseguire co-immunoprecipitazione o elettroforesi su gel nativa per studiare le sue interazioni con gli altri componenti della polimerasi delta.

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