Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Filaggrina (FLG) per WB, ELISA - P20930

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della filaggrina

• La filaggrina (FLG) è una grande proteina ricca di istidina e altamente fosforilata, che svolge un ruolo strutturale fondamentale nella differenziazione epidermica.
• Aggrega i filamenti intermedi di cheratina in macrofibrille dense e promuove la formazione di legami disolfuro, contribuendo alla resistenza meccanica e alla funzione barriera della pelle.
• La FLG viene inizialmente sintetizzata come profilaggrina e immagazzinata nei granuli di cheratoialina; durante la differenziazione terminale, viene processata proteoliticamente in peptidi di filaggrina funzionali.
• A livello subcellulare, la filaggrina si localizza nei granuli citoplasmatici di cheratoialina all'interno dei cheratinociti dello strato granuloso.
• L'espressione tissutale è principalmente cutanea (strato granuloso), ma è stata rilevata anche in timo, stomaco, tonsille, testicoli, placenta, reni, pancreas, ghiandola mammaria, vescica, tiroide, ghiandole salivari e trachea, mentre è assente in cuore, cervello, fegato, polmoni, midollo osseo, intestino tenue, milza, prostata, colon e ghiandola surrenale. Nella pelle, è espressa principalmente nello strato granuloso dell'epidermide. Riferimenti correlati: PMID:19384417 PMID:1429717
• Le modifiche post-traduzionali includono un'estesa fosforilazione e citrullinazione, che ne regolano il processamento e la funzione.
• Le mutazioni nella FLG sono associate all'ittiosi volgare e alla dermatite atopica, sottolineandone il ruolo nel mantenimento dell'integrità della barriera cutanea.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-92) della FLG umana, che può riconoscere sia il precursore profilaggrina sia la filaggrina processata. Si consiglia di includere inibitori delle proteasi durante la preparazione dei campioni per prevenire la degradazione.
• Per il Western blot, è possibile utilizzare lisati di cheratinociti cutanei umani (ad esempio cellule HaCaT sottoposte a differenziazione indotta dal calcio) o estratti tissutali cutanei per rilevare la profilaggrina a lunghezza intera di circa 435 kDa e i suoi frammenti proteolitici. Validare l'anticorpo nel sistema di campionamento pertinente.
• Questo anticorpo è adatto per ELISA; l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione compatibile può consentire immunodosaggi sandwich sensibili per la quantificazione della filaggrina nei fluidi biologici o nei surnatanti cellulari.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata confermata; assicurarsi di ottimizzare i protocolli specifici per la specie quando si utilizzano campioni non umani.

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