Anticorpo policlonale Anti-TDG per WB e ELISA - Q13569

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TDG / G/T mismatch-specific thymine DNA glycosylase (hTDG)

• TDG è una DNA glicosilina con ruoli critici sia nella demetilazione attiva del DNA che nella riparazione per escissione di basi. Riconosce ed escide specificamente la 5-formilcitosina (5fC) e la 5-carbossicitosina (5caC) dai dinucleotidi CpG, facilitando la loro sostituzione con citosina non modificata.
• Oltre alla sua attività demetilasica, TDG corregge i disadattamenti G/T derivanti dalla deaminazione della 5-metilcitosina. Rimuove la timina da misaccoppiamenti G/T, C/T e T/T, con una marcata preferenza per G/T, ma non agisce su coppie A/T o DNA a singolo filamento.
• L'enzima è anche in grado di escidere uracile e 5-bromouracile da misaccoppiamenti con guanina, ampliando la sua sorveglianza sulle basi non canoniche.
• TDG è localizzata esclusivamente nel nucleo, in coerenza con le sue funzioni di mantenimento del genoma.
• Come nodo centrale per la regolazione epigenetica, TDG partecipa alla regolazione trascrizionale promuovendo la demetilazione del DNA a livello di promotori e enhancer genici. È stato dimostrato che agisce sia come attivatore trascrizionale che come regolatore della cromatina.
• Modificazioni post-traduzionali, tra cui la SUMOilazione, modulano la sua attività e le sue interazioni, aggiungendo un ulteriore livello di regolazione alle sue funzioni di riparazione del DNA e trascrizione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato comprende la regione N-terminale (amminoacidi 1-160) della TDG umana. Questo segmento è conservato tra le specie, e supporta la reattività crociata riportata con topo e ratto.
• Per il Western blotting, TDG migra a circa 46 kDa; la preparazione del lisato deve preservare le proteine nucleari. Si consiglia di testare un intervallo di diluizioni (ad es. 1:500–1:2000) e di validare la reazione con appropriati controlli positivi e negativi.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per rilevare la quantità di TDG in estratti nucleari purificati o proteine ricombinanti; assicurarsi che il sistema di cattura/deteczione non interferisca con gli epitopi riconosciuti da questo anticorpo policlonale.

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