Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-CD55 per WB, IHC-P, ELISA - P08174

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Fattore di Accelerazione del Decadimento del Complemento (CD55)

• Il CD55, noto anche come fattore di accelerazione del decadimento (DAF), è una glicoproteina da 41kDa che appartiene alla famiglia delle proteine regolatorie del complemento ed è ancorata alla membrana cellulare tramite una porzione glicosilfosfatidilinositolo (GPI).
• La sua funzione principale è proteggere le cellule ospiti dai danni mediati dal complemento legandosi ai frammenti C4b e C3b, prevenendo la formazione e accelerando il decadimento delle convertasi C3 e C5, inibendo così la cascata di amplificazione del complemento. Riferimenti correlati: PMID:7525274 PMID:28657829
• Il CD55 funge da recettore per diversi enterovirus, inclusi i coxsackievirus A21, B1, B3, B5, l'enterovirus umano 70 e D68, e gli echovirus 6, 7, 11, 12, 20, 21, facilitando l'ingresso virale nelle cellule ospiti.
• È ampiamente espresso sulle membrane cellulari di tutti i tipi cellulari a contatto con le proteine del complemento plasmatico, inclusi gli epiteli che rivestono i compartimenti extracellulari, ed è presente anche in una forma secreta nei fluidi corporei.
• La proteina CD55 contiene quattro ripetizioni consenso brevi (SCR), note anche come domini sushi, e presenta ponti disolfuro che stabilizzano la sua struttura; lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Le varianti genetiche del CD55 sono associate alla sindrome di CHAPLE (iperattivazione del complemento, trombosi angiopatica ed enteropatia con perdita di proteine), e la molecola trasporta il sistema antigenico dei gruppi sanguigni Cromer.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli aminoacidi 50-150 del CD55 umano, situato nella regione N-terminale; questa regione è extracellulare e adatta per rilevare sia la proteina nativa che quella denaturata.
• Per il Western blotting, il CD55 migra a circa 41kDa in condizioni riducenti; utilizzare lisati cellulari umani appropriati (es. HeLa, Jurkat) come controlli positivi e validare la banda con inibitori noti o knockdown tramite siRNA.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e la diluzione dell'anticorpo primario; si raccomandano tessuti con alta espressione di CD55 come rene, polmone o endotelio vascolare.
• Per l'ELISA, questo anticorpo monoclonale può essere impiegato come anticorpo di cattura o di rilevamento; eseguire titrazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e rilevamento.
• Dato che il CD55 è ancorato tramite GPI, considerare l'uso del trattamento con fosfolipasi C specifica per fosfatidilinositolo (PI-PLC) per rilasciare la proteina dalla superficie cellulare per saggi funzionali o per confermare la localizzazione di membrana.

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