Anticorpo Policlonale Anti-ERCC5 per IF/ICC, ELISA - P28715

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina ERCC-5 (XPG) coinvolta nella Riparazione per Escissione del DNA

• ERCC5 (XPG) è un'endonucleasi del DNA specifica per strutture a filamento singolo che effettua l'incisione 3' nella riparazione nucleotidica per escissione (NER). Riferimenti correlati: PMID:32522879, PMID:32821917, PMID:7651464, PMID:8078765

• ERCC5 lega e piega i substrati a bolla di riparazione del DNA e rompe l'impilamento delle basi alle giunzioni DNA a filamento singolo/doppio filamento. Riferimenti correlati: PMID:32522879

• Partecipa alla riparazione basica per escissione (BER) aumentando l'attività di legame e catalitica della DNA glicosilasi NTHL1 per la rimozione delle pirimidine ossidate. Riferimenti correlati: PMID:9927729

• ERCC5 è fondamentale per la NER accoppiata alla trascrizione (TCR): collabora con ERCC6/CSB per riconoscere l'RNA polimerasi II bloccata e stimola l'attività di legame e l'ATPasi di ERCC6/CSB. Riferimenti correlati: PMID:16246722

• La proteina contribuisce al mantenimento della forcella di replicazione e alla stabilità genomica, svolgendo anche un ruolo nella riparazione per ricombinazione omologa (HRR) reclutando RAD51, BRCA2 e PALB2 e stabilizzando le forcelle bloccate. Riferimenti correlati: PMID:26833090, PMID:32522879

• All'interno del complesso TFIIH, ERCC5 stimola l'attività elicasi di XPD/ERCC2 e l'attività translocasi di XPB/ERCC3. Riferimenti correlati: PMID:31253769

• ERCC5 localizza prevalentemente nel nucleo e sui cromosomi.

• Le mutazioni in ERCC5 causano il gruppo G di xeroderma pigmentoso (XPG) e sono anche collegate alla sindrome di Cockayne.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–270) di ERCC5 umano; questo progetto può consentire il riconoscimento della proteina full-length e di alcune isoforme. Validare nel sistema di campioni pertinente.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare la struttura nucleare, dato che ERCC5 è una proteina nucleare.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'uso di un tampone di rivestimento compatibile ed eseguire una titolazione a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di anticorpo e antigene.
• Confermare la reattività crociata nei campioni di topo e ratto confrontando le intensità del segnale con un controllo positivo umano; i livelli di espressione possono variare tra i tessuti.

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