Acetyl-BRD4 (K332) Anticorpo Policlonale Coniglio (SWISS O60885) | WB, ELISA - Rilevazione Acetilazione BRD4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BRD4

• BRD4 (Proteina contenente il dominio bromo 4) è un lettore della cromatina che riconosce gli istoni acetilati, svolgendo un ruolo centrale nella memoria epigenetica e nella regolazione della trascrizione. Rimane associato alla cromatina acetilata durante tutto il ciclo cellulare e aiuta a preservare l'architettura cromatinica per la trascrizione genica post-mitotica. Durante l'interfase, BRD4 recluta il complesso P-TEFb ai promotori e agli enhancer distali, facilitando la fosforilazione del CTD della RNA polimerasi II e l'allungamento trascrizionale. Medita anche l'attivazione di NF-kappa-B legando RELA acetilato e regola la trascrizione dipendente da p53.
  Riferimenti correlati: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19103749, PMID:23086925, PMID:23317504, PMID:23589332, PMID:24360279, PMID:29176719

• Un isoforma di BRD4 funge da isolatore cromatinico nella risposta al danno al DNA reclutando la condensina-2 agli istoni acetilati, limitando così la propagazione della fosforilazione di H2A.X.
  Riferimenti correlati: PMID:23728299

• BRD4 si localizza prevalentemente nel nucleo ed è associato alla cromatina acetilata e ai cromosomi mitotici. Il suo legame alla cromatina è regolato dallo stato di acetilazione degli istoni, influenzato da segnali come l'attivazione della via JNK.
  Riferimenti correlati: PMID:16109376, PMID:21890894, PMID:25593309

• BRD4 è espresso ubiquitariamente ed è soggetto a estese modificazioni post-traduzionali, inclusa la fosforilazione a residui serina multipli (es. S470, S484, S488, S492, S494, S498, S499, S503, S601, S1117, S1126, S1201, S1204) e l'acetilazione a K1111. Questo anticorpo rileva specificamente l'acetilazione a Lys332, una modifica non ancora completamente caratterizzata in UniProt ma progettata basandosi sul peptide immunogeno.
  Riferimenti correlati: PMID:12543779, PMID:18669648, PMID:19608861, PMID:23317504

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide acetilato sintetico che circonda la Lys332 del BRD4 umano, progettato per garantire il riconoscimento specifico della forma acetilata. Per il Western blot, considerare l'uso di estratti nucleari da linee cellulari umane o murine e validare la specificità con saggi di competizione peptidica utilizzando i peptidi acetilati e non acetilati.
• Per l'ELISA, il peptide acetilato può fungere da antigene di rivestimento. Includere controlli appropriati (peptide non acetilato, pozzi vuoti) e ottimizzare le concentrazioni di rivestimento per il miglior rapporto segnale-rumore.
• La reattività dell'anticorpo può dipendere dai livelli di acetilazione, che possono variare con il trattamento cellulare (es. inibitori HDAC). Considerare di stimolare l'acetilazione per migliorare il rilevamento.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nella tua matrice di campione specifica; gli intervalli di concentrazione iniziale raccomandati devono essere determinati empiricamente.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; aliquotare e conservare a -20°C o come raccomandato.

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