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Anticorpo policlonale di coniglio anti-ADARB1 per WB, ELISA - P78563

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Anticorpo policlonale di coniglio anti-ADARB1 per WB, ELISA - P78563

Numero articolo : CM0020514

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Applicazione
WB, ELISA
Reattività Incrociata
Umano, Topo, Ratto
Peso Proteico
81kDa
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Parametro Valore
Nome del prodotto ADARB1 Rabbit pAb
Note/Alias RED1, ADAR2, DRABA2, DRADA2, NEDHYMS, ADARB1
Specie Uomo
GeneID (umano) 104
GeneID 104
Immunogeno Proteina di fusione ricombinante contenente una sequenza corrispondente agli amminoacidi 180-380 di ADARB1 umano (NP_001103.1)
Origine Coniglio
Categoria Anticorpi policlonali
Applicazione WB, ELISA
Reattività crociata Uomo, topo, ratto
SWISS P78563
Peso della proteina 81 kDa
Spedizione Borsa refrigerante

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ADARB1

  • ADARB1 (editasi 1 specifica per l'RNA a doppio filamento), nota anche come ADAR2, DRADA2 o RED1, è un membro della famiglia delle adenosina deaminasi che agiscono sull'RNA (ADAR), che catalizza la deaminazione idrolitica dell'adenosina a inosina (editing da A a I) nei substrati di RNA a doppio filamento (dsRNA).
  • L'editing dell'RNA da A a I mediato da ADARB1 può modulare l'espressione genica attraverso diversi meccanismi, tra cui l'alterazione dei codoni e la ricodifica delle proteine, la regolazione dello splicing del pre-mRNA, la modulazione della stabilità dell'RNA e l'influenza sulla biogenesi e sul targeting dei microRNA.
  • ADARB1 è responsabile dell'editing sito-selettivo di trascritti neuronali chiave, come i recettori del glutammato (GRIA2 nei siti Q/R e R/G, GRIK2), il recettore della serotonina (HTR2C), il recettore GABA (GABRA3) e il canale del potassio voltaggio-dipendente (KCNA1), determinando cambiamenti degli amminoacidi che alterano le proprietà dei canali ionici e dei recettori.
  • L'enzima presenta effetti provirali sia dipendenti sia indipendenti dall'editing sulla replicazione dell'HIV-1: modifica direttamente la 5′UTR virale e sopprime l'attivazione di EIF2AK2/PKR per aumentare la produzione virale.
  • Lo splicing alternativo e l'utilizzo di promotori alternativi generano più isoforme; l'isoforma 1 presenta un'attività catalitica inferiore, mentre l'isoforma 2 mostra un'attività catalitica maggiore in vitro.
  • ADARB1 è localizzata principalmente nel nucleo e nel nucleolo, in linea con il suo ruolo nella modificazione dell'RNA co-trascrizionale e post-trascrizionale.
  • L'espressione è massima nel cervello e nel cuore, con livelli inferiori nella placenta, nei polmoni, nel fegato e nei reni; negli astrocitomi pediatrici, la ridotta attività di editing dell'RNA correla con il grado di malignità tumorale.
  • La proteina contiene domini di legame all'RNA a doppio filamento (dsRBD) e un dominio deaminasi con uno ione zinco coordinato, ed è regolata dalla fosforilazione. Le associazioni patologiche includono la disabilità intellettiva (NEDHYMS) e un ruolo nell'immunità antivirale innata.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

  • L'immunogeno utilizzato è un frammento ricombinante corrispondente agli amminoacidi 180–380 di ADARB1 umano (NP_001103.1). Questa regione si trova all'interno del dominio catalitico/deaminasi N-terminale e gli anticorpi generati contro di essa possono rilevare il target in condizioni denaturanti e native; si consiglia di verificare la reattività nel proprio specifico tipo di campione.
  • Il peso molecolare previsto è di 81 kDa; confermare la migrazione mediante SDS-PAGE in condizioni riducenti. Le modificazioni post-traduzionali o le varianti specifiche delle isoforme possono modificare il peso molecolare apparente.
  • Per il Western blot (WB), utilizzare controlli positivi appropriati, come cervello umano, cuore umano o linee cellulari note per esprimere ADARB1. La reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto ne consente l'uso in studi su modelli di roditori.
  • I protocolli ELISA possono trarre vantaggio dall'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della titolazione dell'anticorpo. La natura policlonale può garantire un rilevamento sensibile nei formati ELISA sandwich o indiretto, se associata a un anticorpo monoclonale di cattura validato.

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