Anticorpo monoclonale coniglio Phospho-p53-S376 per WB, ELISA - P04637

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di p53

• Fattore di trascrizione multifunzionale che agisce come soppressore tumorale indurre l'arresto del ciclo cellulare o l'apoptosi in seguito a danno del DNA. Funziona legandosi a sequenze specifiche di DNA per regolare l'espressione genica bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Media l'apoptosi in parte attraverso l'attivazione trascrizionale di geni pro-apoptotici come BAX e FAS, e la repressione dell'anti-apoptotico Bcl-2. L'attività pro-apoptotica è modulata dalle interazioni con le proteine ASPP PPP1R13B e TP53BP2, che possono essere spostate dall'inibitore iASPP. Riferimenti correlati: PMID:12524540, PMID:17189187
• Regola negativamente la divisione cellulare controllando l'espressione di inibitori del ciclo cellulare come l'inibitore delle chinasi ciclina-dipendenti p21, e può inibire l'attività della chinasi CDK7 in risposta al danno del DNA.
• In condizioni normali si localizza nel nucleo, ma può traslocare nel citoplasma, nei mitocondri e in altri compartimenti; si trova anche nei corpi nucleari PML, nei centrosomi e nel reticolo endoplasmatico, riflettendo le sue diverse funzioni.
• Subisce numerose modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione, ubiquitinazione e sumoilazione, che regolano la sua stabilità, il legame con il DNA e l'attività trascrizionale.
• È espresso ubiquitous nei tessuti; vengono generate più isoforme tramite splicing alternativo e utilizzo di diversi promotori, alcune delle quali mostrano espressione tessuto-specifica e funzioni regolatorie (ad esempio, l'isoforma 2 aumenta la transattivazione, l'isoforma 4 la sopprime, l'isoforma 7 inibisce l'apoptosi).
• Regola il ritmo circadiano reprimendo l'attivazione del gene PER2 mediata da CLOCK-BMAL1. Riferimenti correlati: PMID:24051492
• Agisce come un soppressore tumorale chiave, con mutazioni nel gene TP53 associate alla sindrome di Li-Fraumeni e a molti tumori sporadici, a conferma del suo ruolo critico nel mantenimento della stabilità genomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un fosfo-peptide sintetico corrispondente alle restanti attorno alla S376 della p53 umana. Assicurati di rilevare correttamente lo stato di fosforilazione utilizzando inibitori delle fosfatasi durante la lisisi cellulare e la preparazione dei campioni.
• Per il Western blotting, il trattamento delle cellule con agenti dannosi per il DNA (ad esempio, doxorubicina o irradiazione UV) può aumentare la fosforilazione di p53 alla S376, fornendo un controllo positivo. Il peso molecolare previsto è di circa 44 kDa, ma possono apparire più bande dovute alle diverse isoforme di splicing.
• In ELISA, si consiglia di utilizzare la proteina p53 ricombinante fosforilata alla S376 come standard e di convalidare la specificità del saggio con controlli di peptide non fosforilati.
• La reattività crociata è stata confermata per p53 di uomo e ratto; per altre specie, si consiglia un'analisi dell'omologia di sequenza intorno alla S376 prima dell'utilizzo.

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