Anticorpo monoclonale Anti-PARP1 di Coniglio per IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P09874

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PARP1

• PARP1 è una poli-ADP-ribosiltransferasi che media la PARilazione delle proteine, principalmente sui residui di serina, e svolge un ruolo chiave nella riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Inizia la riparazione delle rotture del DNA riconoscendo e legandosi alle rotture del DNA all'interno della cromatina, reclutando HPF1 e catalizzando la PARilazione degli istoni (es. H2BS6ADPr, H3S10ADPr) per decompattere la cromatina e facilitare l'accesso dei fattori di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625
• PARP1 si accumula nei siti di danno al DNA insieme a TIMELESS e promuove la riparazione per ricombinazione omologa delle rotture a doppio filamento mediando la poli-ADP-ribosilazione. Riferimenti correlati: PMID:26344098, PMID:30356214
• Prevalentemente nucleare (cromatina, nucleolo), PARP1 si trasloca dinamicamente nel citoplasma in caso di danno al DNA o apoptosi, dove regola processi come l'inibizione della via cGAS-STING e l'apoptosi mediata da AIFM1. Riferimenti correlati: PMID:35460603, PMID:33168626
• PARP1 modula la trascrizione legandosi ai nucleosomi e alterando la struttura della cromatina come l'istone H1, agendo sia come repressore che come regolatore dipendente dal contesto dell'elongazione dell'RNA polimerasi II. Riferimenti correlati: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• Durante l'apoptosi, PARP1 viene clivato dalla caspasi-3/7, generando frammenti che si traslocano nel citoplasma, subiscono auto-poli-ADP-ribosilazione e fungono da carrier pro-apoptotico di poli-ADP-ribosio per indurre la morte cellulare mediata da AIFM1. Riferimenti correlati: PMID:33168626

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 700–800 di PARP1 umano (P09874). Questa regione si trova all'interno del dominio catalitico, il che può contribuire alla specificità dell'anticorpo per PARP1 a lunghezza intera.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC e IF-P), considerare l'uso di protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione e includere linee cellulari o tessuti di controllo positivo e negativo noti.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo dovrebbero essere ottimizzate empiricamente; utilizzare tessuti umani, di topo o di ratto con espressione confermata di PARP1 come controlli positivi.
• Nell'ELISA, l'accoppiamento con un anticorpo di rilevamento appropriato può aumentare la sensibilità; validare il saggio con proteina PARP1 ricombinante o lisati cellulari.
• A causa dell'elevato peso molecolare (113kDa), assicurare condizioni ottimali di trasferimento proteico se si utilizza il western blotting come metodo ortogonale.

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