Asymmetric DiMethyl-Histone H4-R3 Rabbit pAb | P62805 | Validato per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istona H4

L'istona H4 è un componente principale del nucleosoma, attorno al quale il DNA è avvolto per formare la cromatina. Questa struttura fondamentale compatta il DNA genomico e ne regola l'accessibilità agli enzimi e ad altri fattori necessari per i processi basati sul DNA, come la trascrizione, la replicazione e la riparazione. Le istoni, inclusa H4, sono quindi centrali per mantenere la stabilità cromosomica e il controllo epigenetico.

Un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali, spesso riferito come codice delle istoni, regola la dinamica della cromatina. L'istona H4 subisce numerose modifiche, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e citrullinazione, a vari residui lungo la sua coda N-terminale e il dominio globulare.

Questo anticorpo si specificamente bersaglia la dimetilazione asimmetrica dell'arginina 3 (R3) nella coda N-terminale dell'istona H4. Nella proteina processata, questo corrisponde al residuo 4 (R4). Questa modifica è catalizzata principalmente dalla protein arginine methyltransferase 1 (PRMT1) e gioca un ruolo nell'attivazione trascrizionale e nel rimodellamento della cromatina.

Riferimenti correlati: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

L'istona H4 è localizzata nel nucleo e nei cromosomi. Durante la spermatogenesi, l'acetilazione di H4 è associata alla sua localizzazione nucleare negli spermatidi allo stadio 11.

Riferimenti correlati: UniProtKB P62805

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è un peptide sintetico che porta dimetilazione asimmetrica a R3, garantendo alta specificità per la forma metilata dell'istone H4. Considerare di validare la specificità confrontando i segnali da saggi di competizione con peptide metilato rispetto a non metilato.
• Per il Western blot (WB), si raccomandano protocolli di estrazione delle istoni che arricchiscano per proteine nucleari o legate alla cromatina. Il peso molecolare previsto dell'istone H4 è di circa 11 kDa, sebbene possa migrare leggermente più in alto o come banda a seconda dell'estensione di altre modifiche e delle condizioni del gel.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC-P), ci si aspetta una colorazione nucleare. Le condizioni di permeabilizzazione e fissaggio potrebbero richiedere ottimizzazione per preservare il riconoscimento dell'epitopo esponendo al contempo il compartimento nucleare.
• Quando si utilizza questo anticorpo in ELISA, considerare il rivestimento con peptide metilato o estratti di istoni per screening dell'attività di legame. Includere sempre i controlli appropriati per escludere legami non specifici.
• È stato riportato che questo anticorpo rileva H4 da umano, topo e ratto, con un'ampia gamma di altre specie prevista. La cross-reattività dovrebbe essere verificata nel sistema di campione pertinente se si lavora con modelli non mammiferi.

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